雞球蟲病活疫苗的研制.pdf

1、雞球蟲病是一種呈全球性分布的原蟲病,其發(fā)病率可高達(dá)50﹪～70﹪,死亡率為20﹪～30﹪,嚴(yán)重者高達(dá)80﹪.每年,全世界因球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失超過30億美元.雖然使用抗球蟲藥這種傳統(tǒng)方法在球蟲病防治中發(fā)揮了積極的作用,但是球蟲耐藥株的不斷出現(xiàn)、公眾對(duì)藥物殘留的恐懼以及新藥研制的缺乏,使得活疫苗接種在不久的將來會(huì)成為控制球蟲病的主要措施.因此,我們開展了本項(xiàng)研究,并取得如下結(jié)果: (1)改進(jìn)了單卵囊分離技術(shù),成功分離到柔嫩、毒害、

2、巨型、堆型、和緩、布氏和早熟艾美耳球蟲蘭州株;克隆了堆型艾美耳球蟲全長(zhǎng)1.7Kb的18S rRNA基因,分析了其遺傳、進(jìn)化特點(diǎn),為從分子水平上研究艾美耳球蟲種系發(fā)生、遺傳進(jìn)化、蟲種分類與鑒定等奠定了基礎(chǔ). (2)測(cè)定了所分離蟲株的毒力(即致病性).實(shí)驗(yàn)證實(shí):每只雞感染6×10<'4>個(gè)孢子化卵囊時(shí),引起較嚴(yán)重的腸道病變,生長(zhǎng)嚴(yán)重受阻;每只雞感染9×10<'5>～1.2×10<'6>個(gè)孢子化卵囊時(shí),約半數(shù)感染雞致死:而1.8×10

3、<'6>個(gè)孢子化卵囊的感染劑量可致全部感染雞死亡.這為進(jìn)行疫苗配制及其免疫效果評(píng)價(jià)時(shí)選擇適宜的攻蟲劑量提供了參考依據(jù). (3)研制出四價(jià)雞球蟲病活疫苗(LCV)、五價(jià)雞球蟲病活疫苗(LCV-1)和六價(jià)雞球蟲病活疫苗(LCV-2),在實(shí)驗(yàn)條件下,給5-10日齡雛雞經(jīng)口接種疫苗,兩周后用與疫苗同源的混合孢子化卵囊大劑量攻蟲,以相對(duì)增重率、死亡率、腸道剖檢病變計(jì)分,平均OPG值和抗球蟲指數(shù)(ACI)為評(píng)價(jià)指標(biāo),觀察了這三種疫苗的安全性

4、和免疫效果.篩選出了最佳免疫劑量,結(jié)果也證實(shí)了這三種疫苗安全性高,免疫保護(hù)效果顯著,與國(guó)內(nèi)外同類疫苗相當(dāng). (4)對(duì)比研究了LCV-2號(hào)對(duì)籠養(yǎng)和平養(yǎng)雞的免疫效果,證實(shí)LCV-2對(duì)籠養(yǎng)雞和平養(yǎng)雞都有較強(qiáng)的免疫效果,而且LCV-2安全性高,即使漏免也不會(huì)造成雞只發(fā)病. (5)評(píng)價(jià)了兩種β-葡聚糖對(duì)LCV的免疫增強(qiáng)效果.結(jié)果表明,在攻蟲后7天和14天,所有免疫組雞的體重均極顯著(P<0.01)高于攻蟲對(duì)照組、香菇糖組和酵母糖組