雞傳染性法氏囊病細(xì)胞活疫苗的研制.pdf

1、傳染性法氏囊病(IBD)是由傳染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的雞和火雞的一種急性高度接觸性傳染病.為了更好地防制IBD,研制一種安全有效的IBD疫苗,并制定出其科學(xué)的免疫程序和方法是很有必要的.該課題分三部分進(jìn)行:第一部分:HDS細(xì)胞苗(自制法氏囊病細(xì)胞活疫苗)的制備.雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)制備時(shí),用0.25％胰蛋白酶對(duì)雞胚組織消化20min為宜.該研究中,在細(xì)胞接種病毒時(shí)運(yùn)用的是異步接種法.對(duì)不同接毒量的實(shí)驗(yàn)表明,每個(gè)方瓶(100

2、ml)接毒0.2ml左右病毒原液為宜.接毒后48h出現(xiàn)細(xì)胞病變(CPE),72h病變達(dá)70％~85％以上.經(jīng)病毒蝕斑形成試驗(yàn)檢測(cè),病毒滴度達(dá)1.0×10<'8>PFU/ml.第二部分:自制細(xì)胞苗HDS的安全性和有效性實(shí)驗(yàn).用不同免疫劑量免疫雛雞,確定了最佳免疫劑量為5.0×10<'5>PFU/ml,最小免疫劑量為1.0×10<'5>PFU/ml.用10倍最佳免疫劑量免疫雛雞,未見(jiàn)雛雞出現(xiàn)明顯臨床癥狀,證明本疫苗安全.用最佳免疫劑量免疫雛

3、雞,對(duì)強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)率達(dá)100％,通過(guò)抗體檢測(cè),免疫后15dAGP陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)100％,免疫后41d ELISA抗體滴度達(dá)9000以上,證明本疫苗效果良好.三種疫苗對(duì)比試驗(yàn)證明,自制HDS疫苗在保護(hù)率和抗體效價(jià)方面上均優(yōu)于以色列疫苗和某國(guó)產(chǎn)疫苗.第三部分:IBD母源抗體對(duì)疫苗免疫的影響.通過(guò)對(duì)含母源抗體的雛雞的抗體檢測(cè),得出了IBD母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律.結(jié)果得出各組雛雞在1~4日齡母源抗體逐漸上升,4日齡時(shí)達(dá)到最高峰,ELISA抗體滴度達(dá)40