狂犬病毒口服活疫苗的研制.pdf

1、人類與狂犬病的博弈已經由來已久，但是時至今日，人或者動物感染狂犬病毒后，如果未作任何醫(yī)學處理，發(fā)病后的死亡率醫(yī)學界公認接近100％。從理論上來說，現(xiàn)在公認的結果是，幾乎所有的飛禽走獸都可以感染和傳播狂犬病。但是最主要的傳播者是犬、貓、鼠等。雖然狂犬病無法治愈，但是人們可以對其預防控制。
　　我國狂犬病疫情世界排名第二，僅次于印度，最近幾年，隨著“寵物熱”的出現(xiàn)我國狂犬病的發(fā)病情況呈現(xiàn)上升趨勢，目前我國防治狂犬病的主要措施有以下兩種

2、方法:一種是捕殺法，易感動物的多少直接影響著狂犬病毒疫情的控制。但是捕殺法是一種很殘酷的措施。只能在少數(shù)動物中實施。另一種是疫苗免疫法，是我國防治狂犬病的主要措施，目前我國主要采用注射用疫苗，但是注射型疫苗無法對野生動物大范圍接種,不能形成免疫圈。而且疫苗價格高，需經過多次注射，注射過程冗繁。相較于注射用疫苗，口服疫苗可以在極大程度上克服以上缺點，口服疫苗方便、安全尤其適合散養(yǎng)犬及野生動物的免疫，有利于建立狂犬病毒免疫群。
　　基

3、于以上問題，本課題分別從制劑學，免疫學方面展開對狂犬病毒口服疫苗的研究，以期能夠為狂犬病毒曝露前免疫預防提供新的免疫疫苗。
　　研究目的：本研究以RV雞胚低代毒(Flury-lep)為模型，海藻酸鈉為緩釋材料，劑型選擇制備工藝簡單的海藻酸鈣緩釋微丸，研制Flury株的口服疫苗。對制備出的口服疫苗進行安全性，有效性，無菌性研究。
　　研究方法：采用單因素實驗和正交試驗相結合的方法優(yōu)化工藝處方，篩選最佳工藝處方制備出疫苗成品，轉

4、籃法測定成品的體外累積釋放曲度，參照中國生物制品規(guī)程進行成品疫苗的無菌檢驗。采用MTT法研究口服疫苗細胞毒性試驗，以WHO規(guī)定的方法研究口服疫苗體內毒性試驗，以普通昆明小鼠為實驗動物進行疫苗免疫效力實驗,分別研究疫苗的體液免疫效果和細胞免疫效果。
　　研究結果：本課題制備出包封率78.64±2.144%，載藥量17.49±1.43%的微丸，體外毒性試驗表明微丸在每實驗孔高達0.5mg的藥量下，作用120h，仍然不會對L929細胞生

5、長造成影響，體內試驗結果表明小鼠正常生長，無明顯異常反應。流式分析小鼠外周血淋巴細胞CD4+和CD8+數(shù)目，結果表明CD4+和CD8+數(shù)目分別由
　　25.81±3.21%和20.51±2.26%上升到41.91±2.32%和25.70±2.11%，CD4+/CD8+的值也由1.26±0.31上升到1.63±0.68,說明小鼠有了較高的細胞免疫反應。體液免疫檢測實驗動物外周血中和抗體效價為1/80。無菌試驗中各培養(yǎng)基未見細菌生長。