LPSp增強狂犬病毒抗原免疫效果的實驗研究.pdf

1、目的：研究革蘭陰性非致病菌成團(tuán)泛菌脂多糖(Pantoea agglomeranslipopolysaccharide，LPSp)作為佐劑對狂犬病毒抗原免疫效果的影響。 方法：1、分組：將純系(Balb/c)小鼠隨機(jī)分為6大組(24只/大組)，(1)LPSp實驗組(含狂犬病毒蛋白+LPSp)；(2)狂犬病毒蛋白對照組；(3)鋁佐劑疫苗對照組(含鋁佐劑的狂犬病疫苗)；(4)聯(lián)合佐劑組(含鋁佐劑+LPSp+狂犬病毒蛋白)；(5)LPS

2、p佐劑對照組；(6)空白對照組(注射生理鹽水)。每大組又分三小組(8只/小組)，即單次免疫組、二次免疫組、四次免疫組；2、免疫方法：單次免疫組在O天免疫一次，二次免疫組在0天、14天各免疫1次，四次免疫組在0天、7天、14天、21天各免疫1次，均經(jīng)背部皮下免疫。3、血清檢測：單次免疫組、二次免疫組、四次免疫組均在第7天、第14天、第21天、第30天、第45天、第60天各通過小鼠眼內(nèi)眥靜脈采血，分離血清置入-80℃保存待測。用ELISA法

3、檢測血清抗狂犬病毒IgG、IgM的滴度，分別比較各組產(chǎn)生抗狂犬病毒抗體滴度的差異，并觀察各組抗狂犬病毒抗體滴度的動態(tài)變化。 結(jié)果：一、各實驗組誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG抗體滴度測定結(jié)果(一)、LPSp實驗組一次免疫、二次免疫、四次免疫分別在第21天、第21天、第30天誘導(dǎo)產(chǎn)生的工gG抗體滴度均顯著高于鋁佐劑疫苗對照組和狂犬病毒蛋白對照組、空白對照組(P<0.05)。LPSp實驗組一次免疫、二次免疫誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體滴度分別在

4、14天和21天達(dá)高峰；LPSp實驗組四次免疫在第60天仍呈上升趨勢，而鋁佐劑疫苗對照組四次免疫后在45天工gG抗體滴度達(dá)高峰，以后隨著時間的延長抗體滴度均逐漸下降。 (二)、聯(lián)合佐劑組與鋁佐劑疫苗對照組一次免疫后的I gG抗體滴度比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，聯(lián)合佐劑組與鋁佐劑疫苗對照組二次免疫、四次免疫后的IgG抗體滴度比較，僅在第14天這個時間段差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其它時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0

5、5)。二、免疫次數(shù)對誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒工gG抗體的影響 結(jié)果： (一)、比較LPSp實驗組、鋁佐劑疫苗組、狂犬病毒蛋白對照組同一時間不同免疫次數(shù)之間抗狂犬病毒IgG抗體滴度，結(jié)果顯示，各大組內(nèi)免疫四次的小鼠產(chǎn)生工gG抗體滴度均顯著高于免疫二次(P<0.05)，免疫二次也顯著高于免疫一次(P<0.05)。 (二)、LPSp實驗組的兩次免疫在30天以前產(chǎn)生的抗狂犬病毒IgG抗體滴度較鋁佐劑疫苗對照組的四次免疫高，

6、但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。四次免疫后LPSp實驗組誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒工gG的滴度在各個時間段均顯著高于五次免疫的鋁佐劑疫苗對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；并且在免疫后第60天仍呈上升趨勢，而五次免疫的鋁佐劑疫苗對照組在第45天IgG的滴度達(dá)到高峰，以后逐漸下降。 三、小鼠血清抗狂犬病毒IgM抗體的檢測結(jié)果LPSp實驗組和聯(lián)合佐劑疫苗組在每一次免疫后第七天IgM抗體滴度分別顯著高于未加LPSp佐劑的狂犬病毒

7、蛋白對照組與鋁佐劑疫苗組對照組。雖然第七天后IgM抗體滴度下降，但再次免疫時又出現(xiàn)以上情況。 結(jié)論： 1．LPSp佐劑有顯著增強小鼠抗狂犬病毒免疫效果的作用：LPSp作為狂犬病毒抗原的佐劑可顯著提高小鼠對狂犬病毒蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG抗體濃度，且可延長抗體的維持時間： 2．LPSp佐劑增強小鼠對狂犬病毒蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生抗狂犬病毒免疫效果優(yōu)于鋁佐劑：LPSp佐劑促進(jìn)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgM、IgG抗體濃度均顯著高