羅氏沼蝦親蝦群體遺傳結(jié)構(gòu)分析及育苗參數(shù)比較.pdf

1、本研究通過對不同養(yǎng)殖群體羅氏沼蝦親蝦進(jìn)行遺傳多樣性分析及生長性能比較，結(jié)合育苗水體水質(zhì)監(jiān)測、氨氮和亞硝酸鹽氮急性毒性試驗(yàn)、育苗工藝關(guān)鍵參數(shù)比較等試驗(yàn)，旨在分析羅氏沼蝦親蝦群體間遺傳結(jié)構(gòu)，探討影響羅氏沼蝦育苗效果與蝦苗后期生長緩慢的原因，為進(jìn)一步優(yōu)化羅氏沼蝦人工育苗工藝參數(shù)，科學(xué)指導(dǎo)羅氏沼蝦苗種生產(chǎn)與種質(zhì)改良提供依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下:
　　1.運(yùn)用SSR分子標(biāo)記技術(shù)分析5個(gè)不同養(yǎng)殖群體羅氏沼蝦的遺傳多樣性及其遺傳結(jié)構(gòu)。選取多態(tài)性較

2、高的6對微衛(wèi)星引物對5個(gè)不同養(yǎng)殖群體進(jìn)行擴(kuò)增，產(chǎn)物檢測結(jié)果顯示，所測6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)多態(tài)性均較高[多態(tài)信息含量(PIC)=0.8448～0.9374]。各群體遺傳多樣性均呈現(xiàn)較高的水平[期望雜合度(He)=0.865～0.889]。群體間遺傳分化指數(shù)(Fst)及AMOVA分析顯示，98.13％的遺傳變異來自群體內(nèi)部，僅有1.87％來自群體間，群體間遺傳分化水平低(Fst＜0.05)。遺傳距離分析結(jié)果表明，浙江群體(ZJ)和南太湖2號群體(

3、NTH)之間的標(biāo)準(zhǔn)遺傳距離最小(Ds=0.0579);浙江群體(ZJ)和上海群體(SH)之間遺傳距離最大(Ds=0.3535)，基于遺傳距離構(gòu)建的UPGMA系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示，5個(gè)群聚為兩個(gè)大支，其中浙江群體(ZJ)和南太湖2號群體(NTH)首先聚為一支，隨后與廣西群體(GX)和馬來西亞群體(ML)聚成的一支再次聚合，最后與上海群體(SH)聚在一起。研究結(jié)果表明5個(gè)羅氏沼蝦養(yǎng)殖群體均具有較高的遺傳多樣性，但群體間親緣關(guān)系較近。
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4、.選取來自4個(gè)不同養(yǎng)殖群體的1280尾羅氏沼蝦蝦苗進(jìn)行為期70天的溫室飼養(yǎng)試驗(yàn)，旨在比較不同養(yǎng)殖群體羅氏沼蝦的生長性能差異。結(jié)果表明:1）4個(gè)群體中上海養(yǎng)殖群體成活率最高(81.88％)，但其增重率最低;南太湖2號群體成活率最低(55.00％)，顯著低于其他三個(gè)群體（P＜0.05），但其增重率最高。2）南太湖2號群體終末體重、增重率、特定生長率均顯著高于其他3個(gè)群體（P＜0.05）;3）4個(gè)養(yǎng)殖群體間肥滿度指標(biāo)差異不顯著（P＞0.05）

5、，但仍以南太湖2號肥滿度最高。結(jié)論:不同養(yǎng)殖群體后代其生長性能存在明顯差異，經(jīng)過選育的南太湖2號群體生長性能較優(yōu)，利于獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益。
　　3.選取3個(gè)幼體投放時(shí)間、投放密度、培育管理均相同的羅氏沼蝦幼體培育池，監(jiān)測育苗周期內(nèi)水體水質(zhì)因子的變動情況并分析變化規(guī)律。結(jié)果表明:1）育苗周期內(nèi)，水體DO隨著幼體培育天數(shù)的增加緩慢下降;pH較為平穩(wěn)，僅有小幅度下降。2）水體中氨氮、亞硝氮濃度均呈鋸齒狀波動上升，且隨著培育天數(shù)的增加，升

6、高速度加快，并于換池前達(dá)到高值。
　　4.選取代表羅氏沼蝦Z3、Z5、Z8幼體發(fā)育期的3個(gè)育苗池，監(jiān)測其一天中水體pH、DO、氨氮、亞硝氮、COD等水質(zhì)因子的變動情況并分析變化規(guī)律。結(jié)果表明:1）處于不同發(fā)育時(shí)期的羅氏沼蝦育苗水體一天中水質(zhì)因子的變化規(guī)律基本相同，較大的波動出現(xiàn)在投餌、吸污操作密集的時(shí)段。2)一天中水體pH保持相對穩(wěn)定;DO緩慢下降后又有所回升，最低值出現(xiàn)在11:00至12:00間;3）氨氮、亞硝氮、COD一天中的

7、波動較大，整體呈上升趨勢，且三者之間的變化具有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性，相鄰變化的時(shí)間間隔在30min～60min。在育苗周期內(nèi)，對蝦苗成活率影響較大的氨氮、亞硝氮濃度變化劇烈，應(yīng)加強(qiáng)對其監(jiān)測的力度，合理設(shè)定投餌、吸污等操作的次數(shù)及時(shí)間點(diǎn)，避免育苗水體水質(zhì)因子出現(xiàn)大幅波動，為幼體營造一個(gè)穩(wěn)定的水體環(huán)境。減小對幼體的毒害作用。
　　5.分別設(shè)置不同氨氮和亞硝氮濃度梯度，研究其對Z5、Z8、Z11期羅氏沼蝦幼體96h急性毒性效應(yīng)。結(jié)果表明:氨氮（

8、非離子氨）對Z5、Z8和Z11羅氏沼蝦幼體的安全濃度分別為2.108(0.115)mg/L、2.747(0.151)mg/L和2.762(0.152)mg/L;亞硝氮對羅氏沼蝦Z5、Z8和Z11的安全濃度分別為1.078mg/L、1.238mg/L和2.048mg/L。建議在育苗生產(chǎn)過程中控制育苗水體非離子氨和亞硝氮濃度分別不高于0.10mg/L和1.00mg/L。
　　6.設(shè)置不同幼體放養(yǎng)密度梯度，研究其對羅氏沼蝦育苗水體水質(zhì)因

9、子及出苗率的影響。結(jié)果表明:在一定的范圍內(nèi)，羅氏沼蝦幼體的投放密度顯著影響成活率，當(dāng)幼體密度從12萬尾/m3提高到16萬尾/m3時(shí)，育苗周期內(nèi)水體溶氧的平均值降低8.5％，氨氮、亞硝氮的平均濃度分別從1.539mg/L和0.256mg/L升高至2.460mg/L和0.388mg/L，成活率從63.75％降低至43.88％，但從經(jīng)濟(jì)效益的角度出發(fā)，合理提高幼體投放密度可帶來最大收益。建議生產(chǎn)中育苗生產(chǎn)中投放幼體時(shí)密度不宜過高，以降低育苗過

10、程中水質(zhì)管理的難度，提高單位水體的出苗量和經(jīng)濟(jì)效益。
　　7.采用二次回歸正交組合設(shè)計(jì)研究人工海水中Ca2+、Mg2+、K+的含量對羅氏沼蝦出苗率的影響。結(jié)果表明:在試驗(yàn)范圍內(nèi)最優(yōu)海水配方Ca2+、Mg2+、K+濃度分別為165mg/L、375mg/L、150mg/L，在此優(yōu)化方案下受試幼體平均變態(tài)率達(dá)60.0％，生產(chǎn)性育苗幼體平均變態(tài)率達(dá)61.8％，與該場原配方相比育苗效果提升明顯。
　　8.選取羅氏沼蝦育苗池4個(gè)，設(shè)4個(gè)

11、處理。即A，對照組，不使用任何藥物; B，頭孢噻呋鈉組;C，甲磺酸左旋氧氟沙星組;D，土霉素組。在育苗過程中測定常規(guī)水質(zhì)指標(biāo)及細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌數(shù)、氣單胞菌數(shù)及弧菌數(shù);育苗結(jié)束計(jì)算各組的出苗數(shù)與出苗率并取各組蝦苗至試驗(yàn)溫室進(jìn)行生長試驗(yàn)，旨在探討羅氏沼蝦育苗過程使用不同種類抗生素對育苗水體水質(zhì)、細(xì)菌數(shù)量、蝦苗出苗率及仔蝦生長的影響。結(jié)果表明:1）3種不同抗生素均可減少水體細(xì)菌總數(shù)和氣單胞菌數(shù);甲磺酸左旋氧氟沙星減少大腸桿菌數(shù)明顯，頭孢噻呋

12、鈉次之，弧菌未檢出。2）3種抗生素對改善水體氨氮、亞硝氮等常規(guī)水質(zhì)指標(biāo)作用不明顯。3）育苗效果以左氧組較好，頭孢組次之，土霉素組與對照組相近且低于前兩組。4）生長試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，土霉素組蝦的生長最差，且顯著低于其它各組（P＜0.05），其他組間生長指標(biāo)無顯著差異（P＞0.05）。結(jié)論:不同種類抗生素處理對羅氏沼蝦育苗池水體細(xì)菌數(shù)和育苗出苗率影響顯著，但對水質(zhì)的改善作用有限;育苗過程使用土霉素可能會影響蝦苗養(yǎng)成期的生長。建議在羅氏沼蝦育苗期