家禽養(yǎng)殖過程中彎曲菌的定量跟蹤調(diào)查及其分子流行病學研究.pdf

1、揚州大學碩士學位論文二、基于P F G E 的家禽養(yǎng)殖過程中彎曲菌傳播生態(tài)規(guī)律分析利用P F G E 對不同雞群養(yǎng)殖過程中不同周齡的3 6 5 株彎曲菌分離株進行分型實驗，根據(jù)菌株間相似性系數(shù)( F 值) 大于0 ．7 5 視為同一譜型菌株來對每個雞群的彎曲菌分離株的P F G E 分型結(jié)果進行分析。結(jié)果表明，草雞、B B 、F F 、J ．、J + 、J J 、白雞這7 個雞群非定點雞不同劇齡彎曲菌分離株的P F G E 譜型數(shù)從7

2、．2 5 不等，雞群1 定點雞不同周齡的1 6 4 株分離株分為7 9 個P F G E譜型，且每只雞體內(nèi)的彎曲菌分離株也分為6 ．1 0 個P F G E 譜型；另外，草雞雞群中同一周齡的彎曲菌分離株具有不同的P F G E 譜型( P F l 、P F 8 、P F l 5 等均有8 周齡的分離株) ，不同周齡的分離株具有相同的P F G E 譜型( P F 4 、P F 8 、P F 9 等) ，表明養(yǎng)殖過程中彎曲菌基因組的多樣性

3、與保守性。雞群1 定點雞同一周齡彎曲菌分離株的分型結(jié)果顯示，不同周齡彎曲菌分離株的P F G E 譜型數(shù)從6 到2 l 不等，與雞群年齡和分離菌株數(shù)目有一定的相關(guān)性。環(huán)境樣品中，污水、蒼蠅、鞋底擦拭、地面擦拭、飼料、飲水、墊料和土壤中的部分彎曲菌分離株和雞源彎曲菌分離株具有相同的P F G E 譜型，表明環(huán)境中存在的彎曲菌是雞群感染的來源；此外，環(huán)境源彎曲菌分離株含有多個P F G E 譜型，可能是雞體內(nèi)彎曲菌基因多樣性的原因之一。雞源

4、和各種環(huán)境樣品彎曲菌分離株之間的遺傳關(guān)系分析顯示，同一P F G E 譜型包含不同來源彎曲菌分離株，表明在養(yǎng)殖場環(huán)境源彎曲菌是雞群感染的重要來源。分子分型研究表明，P F G E 可作為研究彎曲菌感染、傳播和種群結(jié)構(gòu)的有力工具。三、家禽養(yǎng)殖過程中彎曲菌分離株藥敏特性及毒力基因分布分析1 6 5 株不同周齡彎曲菌分離株對2 1 種抗生素的耐藥性分析顯示，高度耐藥的是：青霉素G 、頭孢克羅、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、萘啶酸、復方新諾

5、明、四環(huán)素，高度敏感的是：阿莫西林／克拉維酸、亞胺培南。耐藥菌株的多重耐藥分布于8 耐到1 8 耐，其中8 耐到1 5 耐最多，達8 6 ．0 5 ％。空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌對于部分抗生素的耐藥率存在較大的差異( p < 0 ．0 1 ) ，且結(jié)腸彎曲菌耐藥性和多重耐藥現(xiàn)象更為嚴重。不同周齡雞源分離株的耐藥特性分析顯示，隨著周齡的增大，青霉素G 、喹諾酮類、磺胺類、四環(huán)素類等抗生素總體耐藥平穩(wěn)，頭孢菌素類抗生素的耐藥率隨著周齡的增

6、大而增大，而青霉素類、氨基糖甙類、大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素類等抗生素在7 周齡、9 周齡、1 1 周齡時的耐藥率顯著高于其他周齡( p < 0 ．0 5 ) ；此外，不同周齡彎曲菌分離株的多重耐藥狀況也存在變化：7 周齡、9 周齡、1 1 周齡時耐藥菌株的多重耐藥主要集中在1 2 耐至1 8 耐，而其他周齡耐藥菌株的多重耐藥主要集中在8 耐至1 2 耐。9 5 株不同周齡彎曲菌分離株毒力相關(guān)基因分析顯示，黏附相關(guān)基因中舢和c a d

7、F 的陽性率較高，分別為9 1 ．5 8 ％和9 5 ．7 9 ％；定植因子中陽性率較高的是r a c R ( 9 0 ．5 3 ％) ；入．．4 ．． 揚州大學碩士學位論文Q u a n t i t a t i v et r a c k i n gs u r v e ya n d m o l e c u l a r e p i d e m i o l o g yo fC a m p y l o b a c t e r i nb r o

8、 i l e r sd u r i n g r e a r i n g p e r i o dM ．S ．c a n d i d a t e ：T i a n t i a n Y i nA d v i s o r s ：P r o f ．X i n ’a n J i a oP r o f ．J i n l i nH u a n gA b s t r a c tC a m p y l o b a c t e ri s t h em o s

9、 tc o m m o n l yi d e n t i f i e d b a c t e r i a c a u s i n gh u m a ng a s t r o e n t e r i t i sw o r l d w i d e ，o n l ya f t e rS a l m o n e l l aa n ds h i g e l l n ．P o u l t r ya r ec o n s i d e r e dt h

10、 e n a t u r a lr e s e v o i ro fC a m p y l o b a c t e r ．M a n yc h i c k e n f l o c k sa r ei n f e c t e dw i t hC a m p y l o b a c t e r b u ts h o w e dn os i g n so fi l l n e s sd u r i n gt h e i rr e a r i

11、n gp e r i o d ．A n d C a m p y l o b a c t e ra r es h e d d i n gs u s t a i n a b l et ot h eo u t s i d ew o r l d ，w h i c h i s e a s i l y t o c a u s ec o n t a m i n a t i o n o f c h i c k e n m e a t a n d i t

12、 s p r o d u c t s d u r i n gs l a u g h t e r i n g ，p r o c e s s i n ga n dr e t a i l ．T h ep u b l i ch e a l t hb e n e f i t so f c o n t r o l l i n gC a m p y l o b a c t e ri np r i m a r yb r o i l e rp r o d

13、 u c t i o na r ee x p e c t e dt ob e g r e a t e rt h a nc o n t r o l l a t e ri nt h ef o o d c h a i n ，a n dw h i c h w o u l d r e d u c e t h er i s ko f h u m a n e x p o s u r e t ot h i sp a t h o g e n ．I t i

14、 s a n e c e s s a r y p r e r e q u i s i t et o p r e v e n ta n dc o n t r o lC a m p y l o b a c t e r c o n t a m i n a t i o nt h a tw es h o u l d f u l l y r e c o g n i z e t h e e c o l o g i c a l t r a n s m

15、i s s i o n r u l e o fC a m p y l o b a e t e r i n f e c t i o n d u r i n gr e a r i n gp e r i o d ．A l t h o u g hm a n y c o u n t r i e sh a d c a r r i e do u t s y s t e m a t i cs t u d i e s o f C a m p y l o

16、b a c t e r o nd i f f e r e n th o s ta n df o o d ，b u tt h eq u a n t i t a t i v ee p i d e m i o l o g i c a ls t u d i e so nC a m p y l o b a c t e r d u r i n gp o u l t r y r e a r i n gp e r i o d a r e r e l a

17、 t i v e l y S C a r C e ．T h i s s t u d y a i m s t o s u r v e y t h e q u a l i t a t i v e a n dq u a n t i t m i v ee p i d e m i o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c so fC a m p y l o b a c t e ro nf i x e

18、dp o i n tc h i c k e n sd u r i n gr e a r i n gp e r i o d ．W et h e nu s e dp u l s e d —f i e l dg e le l e c t r o p h o r e s i s ( P F G E ) f o rg e n o t y p i n gr e s e a r c h ，a n dd e t e c t e dt h ea n t

19、i m i c r o b i a lr e s i s t a n c ea n d t h ev i r u l e n c eg e n e so f C a m p y l o b a c t e ri s o l a t e s ，i no r d e rt o e x p l o r et h ee c o l o g i c a l r u l eo fc o l o n i z a t i o n a n dd i s

20、s e m i n a t i o nd u r i n g r e a r i n gp e r i o d ，p r o v i d i n g v a l u a b l eg u i d a n c ef o rd a i l y m a n a g e m e n t a n d t h ec o n t r o lo f C a m p y l o b a c t e r1 ．Q u a n t i t a t i v e

21、t r a c k i n gs u r v e yo f C a m p y l o b a c t e r i nb r o i l e r sd u r i n gr e a r i n g p e r i o dT o a s s e s st h er i s k so fC a m p y l o b a c t e r i np o u l t r yr e a r i n gp e r i o d ，q u a l i

22、t a t i v ea n dq u a n t i t a t i v es u r v e y sw e r ep e r f o r m e d i n s u c c e s s i o n ．I nt h i ss t u d y ，c l o a c a ls w a b s f r o m3 0f i x e d p o i n tc h i c k e n so f e a c h f l o c k ，a n de

23、n v i r o n m e n t a ls a m p l e sw e r ec o l l e c t e df r o m p o u l t r y r e a r i n gp e r i o d ．T h el e v e lo fC a m p y l o b a c t e rc o n t a m i n a t i o n w a st e s t e d u s i n gt h e d i r e c t