母愛(ài)剝奪導(dǎo)致大鼠痛情緒加劇的神經(jīng)機(jī)制.pdf

1、目的：
　　1、建立母愛(ài)剝奪的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)以SD大鼠為研究對(duì)象，通過(guò)限制筑巢材料為母愛(ài)剝奪的手段，對(duì)新生SD大鼠進(jìn)行生命早期應(yīng)激，建立大鼠母愛(ài)剝奪模型。
　　2、利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)母愛(ài)剝奪大鼠痛情緒相關(guān)核團(tuán)的fos蛋白的表達(dá)，研究母愛(ài)剝奪導(dǎo)致痛情緒加劇的神經(jīng)機(jī)制。
　　方法：
　　1、建立大鼠母愛(ài)剝奪模型，將6只初次懷孕16天母鼠單籠飼養(yǎng)，生產(chǎn)后，調(diào)整每籠飼養(yǎng)7-8只新生大鼠及1只哺乳期母鼠，分娩的4

2、8只新生大鼠被隨機(jī)分為對(duì)照組24只和母愛(ài)剝奪組24只。對(duì)照組給予足量的筑巢材料（50g脫脂棉花），正常飼養(yǎng);母愛(ài)剝奪組在出生后的第2天起給予對(duì)照組的1/3筑巢材料(16.7g脫脂棉花)，其它條件均相同。2周后斷奶。
　　2、按照F-CPA試驗(yàn)第4天的區(qū)別，將母愛(ài)剝奪組和對(duì)照組各分3個(gè)小組:F-CPA(15min)組、F-CPA(2h)組、F-CPA喚醒組。F-CPA(15min)組在F-CPA試驗(yàn)的第4天自由探索15min，F(xiàn)-C

3、PA(2h)組在F-CPA試驗(yàn)的第4天自由探索2h，F(xiàn)-CPA喚醒組在F-CPA試驗(yàn)的第4天放入福爾馬林匹配室2h對(duì)痛經(jīng)歷進(jìn)行喚醒。
　　3、在結(jié)束行為學(xué)測(cè)試后，用2％戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。取腦脊液和血標(biāo)本后，急性斷頭取腦，制備大鼠的大腦石蠟標(biāo)本，常規(guī)切片，行HE染色及運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)fos蛋白在成年大鼠大腦組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、母愛(ài)剝奪對(duì)大鼠應(yīng)激激素水平的影響:F-CPA(1

4、5min)對(duì)照組大鼠第4天F-CPA實(shí)驗(yàn)后的血清皮質(zhì)醇濃度為:141.7±15.4(ng/ml)，而F-CPA(15min)母愛(ài)剝奪組大鼠第4天F-CPA實(shí)驗(yàn)后血清皮質(zhì)醇濃度為158.0±22.7(ng/ml)(t=-3.097，P=0.01)。F-CPA(15min)對(duì)照組大鼠腦脊液的ACTH濃度為173.6±21.7(ng/ml)，而F-CPA(15min)母愛(ài)剝奪組ACTH濃度為186.2±16(ng/ml)（t=-2.533，P

5、=0.028）。[這部分實(shí)驗(yàn)由同門徐銀權(quán)完成]
　　2、F-CPA(15min)對(duì)照組人鼠(n=7)在F-CPA實(shí)驗(yàn)中第1天在條件刺激匹配室的平均活動(dòng)時(shí)間為485.6±146.9s，第4天的平均活動(dòng)時(shí)間為368.1±137.0s（t=3.719，P=0.01）。F CPA(15min)母愛(ài)剝奪組大鼠在F-CPA實(shí)驗(yàn)中的第1天在條件刺激匹配室的平均活動(dòng)時(shí)間為490.8±154.8s，第4天平均活動(dòng)時(shí)間為227.1±117.6s（t=

6、4.867，P=0.005）。F-CPA(15min)對(duì)照組回避分?jǐn)?shù)為117.2±83.6s，F(xiàn)-CPA(15min)母愛(ài)剝奪組回避分?jǐn)?shù)為263.5±132.4s（t=-2.422，P=0.034）。對(duì)照組大鼠的平均體重為294.3±59.3g，母愛(ài)剝奪組大鼠平均體重為300.1±67.2g(P＞0.05)。
　　3、在F-CPA喚醒對(duì)照組，可見(jiàn)fos陽(yáng)性細(xì)胞在梨形皮質(zhì)、前額葉皮層、扣帶皮質(zhì)、腹后外側(cè)核、副嗅束床核有表達(dá)。在F-C