母愛剝奪導(dǎo)致大鼠痛情緒加劇的神經(jīng)機制.pdf

1、目的：
　　1、建立母愛剝奪的實驗動物模型。實驗以SD大鼠為研究對象，通過限制筑巢材料為母愛剝奪的手段，對新生SD大鼠進行生命早期應(yīng)激，建立大鼠母愛剝奪模型。
　　2、利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測母愛剝奪大鼠痛情緒相關(guān)核團的fos蛋白的表達，研究母愛剝奪導(dǎo)致痛情緒加劇的神經(jīng)機制。
　　方法：
　　1、建立大鼠母愛剝奪模型，將6只初次懷孕16天母鼠單籠飼養(yǎng)，生產(chǎn)后，調(diào)整每籠飼養(yǎng)7-8只新生大鼠及1只哺乳期母鼠，分娩的4

2、8只新生大鼠被隨機分為對照組24只和母愛剝奪組24只。對照組給予足量的筑巢材料（50g脫脂棉花），正常飼養(yǎng);母愛剝奪組在出生后的第2天起給予對照組的1/3筑巢材料(16.7g脫脂棉花)，其它條件均相同。2周后斷奶。
　　2、按照F-CPA試驗第4天的區(qū)別，將母愛剝奪組和對照組各分3個小組:F-CPA(15min)組、F-CPA(2h)組、F-CPA喚醒組。F-CPA(15min)組在F-CPA試驗的第4天自由探索15min，F(xiàn)-C

3、PA(2h)組在F-CPA試驗的第4天自由探索2h，F(xiàn)-CPA喚醒組在F-CPA試驗的第4天放入福爾馬林匹配室2h對痛經(jīng)歷進行喚醒。
　　3、在結(jié)束行為學(xué)測試后，用2％戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。取腦脊液和血標(biāo)本后，急性斷頭取腦，制備大鼠的大腦石蠟標(biāo)本，常規(guī)切片，行HE染色及運用免疫組化技術(shù)檢測fos蛋白在成年大鼠大腦組織中的表達。
　　結(jié)果：
　　1、母愛剝奪對大鼠應(yīng)激激素水平的影響:F-CPA(1

4、5min)對照組大鼠第4天F-CPA實驗后的血清皮質(zhì)醇濃度為:141.7±15.4(ng/ml)，而F-CPA(15min)母愛剝奪組大鼠第4天F-CPA實驗后血清皮質(zhì)醇濃度為158.0±22.7(ng/ml)(t=-3.097，P=0.01)。F-CPA(15min)對照組大鼠腦脊液的ACTH濃度為173.6±21.7(ng/ml)，而F-CPA(15min)母愛剝奪組ACTH濃度為186.2±16(ng/ml)（t=-2.533，P

5、=0.028）。[這部分實驗由同門徐銀權(quán)完成]
　　2、F-CPA(15min)對照組人鼠(n=7)在F-CPA實驗中第1天在條件刺激匹配室的平均活動時間為485.6±146.9s，第4天的平均活動時間為368.1±137.0s（t=3.719，P=0.01）。F CPA(15min)母愛剝奪組大鼠在F-CPA實驗中的第1天在條件刺激匹配室的平均活動時間為490.8±154.8s，第4天平均活動時間為227.1±117.6s（t=

6、4.867，P=0.005）。F-CPA(15min)對照組回避分?jǐn)?shù)為117.2±83.6s，F(xiàn)-CPA(15min)母愛剝奪組回避分?jǐn)?shù)為263.5±132.4s（t=-2.422，P=0.034）。對照組大鼠的平均體重為294.3±59.3g，母愛剝奪組大鼠平均體重為300.1±67.2g(P＞0.05)。
　　3、在F-CPA喚醒對照組，可見fos陽性細胞在梨形皮質(zhì)、前額葉皮層、扣帶皮質(zhì)、腹后外側(cè)核、副嗅束床核有表達。在F-C