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1、目的: 探討淺藍(lán)菌素誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS凋亡的可能信號(hào)傳導(dǎo)通路。 方法: 采用Western blotting檢測(cè)Cerulenin處理后骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS中線(xiàn)粒體傳導(dǎo)通路相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)變化情況。①藥物濃度組分別用2.5mg/l、5.0mg/l、10.0mg/l、20.0mg/l濃度的Cerulenin作用于骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS24h后終止培養(yǎng);②時(shí)間組:根據(jù)MTT實(shí)驗(yàn)所得IC50選用
2、5.0mg/l的Cerulenin分別作用骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS24h、48h、72h后終止培養(yǎng);單去污細(xì)胞裂解液提取蛋白,分光光度計(jì)進(jìn)行蛋白定量調(diào)整樣本總蛋白量相等,進(jìn)行Westernblotting實(shí)驗(yàn)。圖像結(jié)果采用Bandscan5.0圖像分析軟件分析。 結(jié)果: ①藥物濃度組2.5mg/l、5.0mg/l、10.0mg/l、20.0mg/l濃度的Cerulenin作用于骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS24h,隨著淺藍(lán)菌素濃度
3、的增加Bcl-2的表達(dá)量逐漸減少而B(niǎo)ax的表達(dá)量逐漸增加;時(shí)間組5.0mg/l的Cerulenin分別作用骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS24h、48h、72h后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)Bcl-2的表達(dá)量逐漸減少、Bax的表達(dá)量逐漸增加。 結(jié)論: 骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS中Bcl-2和Bax陽(yáng)性表達(dá);Cerulenin作用于U2-OS后隨著濃度的增加或處理時(shí)間的延長(zhǎng)Bcl-2表達(dá)量減少而B(niǎo)ax表達(dá)量增加;相反,Cerulenin濃度降低或作用
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