K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對小鼠CVB3性心肌炎的治療作用.pdf

1、目的：觀察抗柯薩奇B病毒性心肌炎膠囊（K-CoxB-JN）復(fù)方新制劑對小鼠柯薩奇B3病毒（coxsackie virus B3，CVB3）性心肌炎的治療作用，為該藥應(yīng)用于臨床提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1、小鼠病毒性心肌炎（Viral myocarditis, VMC）模型的建立：首先在Hep-2細(xì)胞上擴(kuò)增 CVB3，測定 CVB3的半數(shù)組織感染量（TCID50）。然后選用雄性Balb/c小鼠78只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)

2、分為6組。取一組做為空白對照組，腹腔注射生理鹽水0.2ml/只，其余5組分別腹腔注射濃度10-6，10-7，10-8，10-9，10-10的CVB30.2ml/只，建立小鼠病毒性心肌炎模型。記錄小鼠的一般狀態(tài)和死亡數(shù)，14天時(shí)處死小鼠檢測血清心肌酶，臟器指數(shù)，做心肌組織病理檢查，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果決定正式實(shí)驗(yàn)中病毒的接種量。2、K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對小鼠CVB3性心肌炎的治療作用：選取正常的Balb/c雄性小鼠210只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一

3、周后，隨機(jī)抽取20只作為正常對照組，腹腔注射生理鹽水0.2ml/只，其余小鼠腹腔注射CVB30.2ml/只，建立 VMC模型，之后隨機(jī)分為5組，即 K-CoxB-JN復(fù)方新制劑低、中、高劑量組，利巴韋林組，模型組，分別予 K-CoxB-JN復(fù)方新制劑低（0.2g/kg）、中（0.4g/kg）、高劑量（0.8g/kg），利巴韋林（0.075 g/kg）和純水（0.2ml/10g），灌胃給藥，連續(xù)14天。觀察小鼠的一般狀態(tài)、記錄死亡數(shù)，在第

4、7天每組隨機(jī)抽取小鼠8只，第14天取每組剩余小鼠稱體重，取血測天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、肌酸激酶（CK）及乳酸脫氫酶（LDH）；之后取心、脾、胸腺稱重，計(jì)算臟器指數(shù)；取心尖部心臟放入10％甲醛中固定，HE染色觀察心肌病理變化，記錄病理積分。
　　結(jié)果：1、小鼠病毒性心肌炎模型建立的結(jié)果：CVB3感染 Hep-2細(xì)胞，測得 CVB3的TCID50為10-7.5/0.1ml；感染 CVB3小鼠的一般狀態(tài)，死亡率及臟器指數(shù)與病毒接

5、種濃度成正相關(guān)，病毒感染濃度為10-7～10-10時(shí)小鼠死亡率低于50%，病毒感染濃度為10-6時(shí)小鼠死亡率大于50%，且血清心肌酶活性均明顯升高，心肌組織病變明顯，在病理積分上較其它組為重 P<0.05，和正常對照組比較 P<0.05。2、K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對 VMC小鼠一般情況和死亡數(shù)的影響：正常對照組小鼠攝食、活動(dòng)等一般狀況良好，模型組出現(xiàn)活動(dòng)減少，攝食下降，皮毛稀疏無光澤等癥狀，其余給藥組狀態(tài)稍好，各給藥組小鼠死亡數(shù)均

6、低于模型組。3、K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對 VMC小鼠臟器指數(shù)的影響：給藥第7天和第14天，正常組小鼠各臟器指數(shù)低于 VMC各組 P<0.05，差異顯著；模型組小鼠心重指數(shù)高于各給藥組P<0.05，有明顯差異，但脾重指數(shù)、胸腺指數(shù)與各給藥組比較 P>0.05；利巴韋林組各臟器指數(shù)與其余各給藥組比較P>0.05。給藥第14天和第7天比較，各組臟器指數(shù)均有下降趨勢。4 K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對VMC小鼠血清心肌酶的影響：給藥第7天

7、和第14天，正常組小鼠AST、CK、LDH低于其余各組P<0.05，有明顯差異；模型組小鼠 AST、CK、LDH明顯高于各給藥組 P<0.05；利巴韋林組小鼠AST、LDH和中藥低劑量組比較 P<0.05，與中藥中、高劑量組比較 P>0.05，利巴韋林組小鼠CK與其余給藥組比較P>0.05，無明顯差異。第14天和第7天比較，各給藥組小鼠AST、CK、LDH略有下降。5 K-CoxB-JN復(fù)方新制劑對VMC小鼠心肌病理改變的影響：在光鏡下

8、觀察，正常組小鼠的心肌組織結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，無異常改變；模型組小鼠心肌排列紊亂，心肌細(xì)胞出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤及壞死，各給藥組小鼠心肌病變較模型組明顯減輕。給藥第7天和第14天，正常組小鼠心臟病理積分低于其余各組 P<0.05，差異顯著；模型組小鼠心臟病理積分高于其余各組 P<0.05；利巴韋林組小鼠心臟病理積分和中藥低劑量組比較 P<0.05，與中藥中、高劑量組比較P>0.05，無明顯差異。
　　結(jié)論：1、通過一次性腹腔注射濃度為1