蛋白質(zhì)組學(xué)在胰腺假乳頭狀實(shí)體瘤標(biāo)志物中的初步研究.pdf

1、目的：胰腺假乳頭狀實(shí)體瘤（SPT）為一種低度惡性腫瘤。目前對(duì)于SPT疾病的發(fā)生，組織來(lái)源等仍所知甚少，亦缺乏特異性的SPT相關(guān)腫瘤標(biāo)志物。使用等重同位素多標(biāo)簽相對(duì)或絕對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)（iTRAQ）方法，針對(duì)腫瘤蛋白質(zhì)進(jìn)行同位素相對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析，了解SPT組織與正常胰腺組織之間的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。探討SPT發(fā)病機(jī)制，并對(duì)其組織起源進(jìn)行研究。同時(shí)尋求SPT特異性蛋白質(zhì)作為其腫瘤生物標(biāo)志物。
　　方法：選取SPT手術(shù)標(biāo)本共九例，每例

2、標(biāo)本包括腫瘤組織及正常胰腺組織作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，隨后將標(biāo)本處理后，肽段iTRAQ標(biāo)記分級(jí)、LC-MS質(zhì)譜分析、數(shù)據(jù)分析以得出蛋白質(zhì)的定量及定性結(jié)果。進(jìn)一步行KEGG通路分析，分析并確定差異表達(dá)蛋白質(zhì)參與的最主要的代謝和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
　　結(jié)果：iTRAQ方法從腫瘤和對(duì)照組標(biāo)本中同分析獲得差異表達(dá)蛋白質(zhì)1171種（Ratio>+/-1.5，P<0.05）。分析所得SPT組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)加工通路相關(guān)蛋白質(zhì)存在明顯差異表達(dá)，其可能與SPT

3、腫瘤形成相關(guān)，同時(shí)鑒定出上調(diào)蛋白MSI2/DKK4，以及下調(diào)蛋白EPHX2/JUP四個(gè)蛋白作為生物標(biāo)志物候選蛋白。
　　結(jié)論：本次研究，建立了以iTRAQ技術(shù)及液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法作為方法，用于SPT腫瘤組織和對(duì)照正常組織的蛋白質(zhì)組分析的可靠實(shí)驗(yàn)方法。首次發(fā)現(xiàn)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與SPT腫瘤形成的關(guān)系。SPT異常表達(dá)MSI2/DKK4/EPHX2和JUP四種蛋白質(zhì)，其中可能包含有能作為SPT腫瘤組織生物標(biāo)志物的蛋白質(zhì)。
　　MSI2、

4、DKK4、EPHX2和JUP在胰腺假乳頭狀實(shí)體瘤中的表達(dá)及其意義
　　目的：研究Msi2、DKK4、EPHX2以及連接斑珠蛋白（junction plakoglobin，JUP）作為潛在的生物標(biāo)志物對(duì)胰腺假乳頭狀實(shí)體瘤的診斷意義。
　　方法：SPT標(biāo)本共23例，對(duì)照組取正常胰腺組織標(biāo)本5例，制備組織芯片。對(duì)SPT及正常對(duì)照組織的免疫組化染色強(qiáng)度和染色面積進(jìn)行評(píng)估。染色強(qiáng)度分別為0，1+，2+，3+，其分別代表陰性、輕度陽(yáng)性、

5、中度陽(yáng)性及強(qiáng)陽(yáng)性。
　　結(jié)果：MSI2陽(yáng)性表達(dá)在23例SPT腫瘤組織樣本中占91.3%（21/23），對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)為2例（2/5），ROC曲線下面積為0.870，敏感性為82.5%，特異性為80.0%。DKK4陽(yáng)性表達(dá)占91.3%（21/23），AUC為0.904，敏感性為91.3%，特異性為60.0%。EPHX2陽(yáng)性表達(dá)占60.9%（14/23），JUP陽(yáng)性表達(dá)占52.2%（12/23），EPHX2、JUP在正常胰腺組織中均有