抑癌基因PDCD4抑制人上皮性卵巢癌惡性行為的研究.pdf

1、山東大學博士學位論文抑癌基因PDCD4抑制人上皮性卵巢癌惡性行為的研究姓名：魏增濤申請學位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導(dǎo)教師：傅慶詔張利寧20091022山東大學博學位論文◆PDCD4對上皮性卵巢癌細胞惡性行為影響的實驗研究◆超聲及微泡劑介導(dǎo)PDCD4基因抑制裸鼠卵巢癌移植瘤生長的實驗研究材料與方法一、PDCD4在漿液性囊腺癌組織中的表達及其臨床意義1臨床病例標本及病歷資料的收集：收集山東大學齊魯醫(yī)院、山東大學第二醫(yī)院、濟南市中心醫(yī)院婦科

2、20012007年間，年齡在3574歲(平均53歲)之間的69例漿液性腫瘤(26例漿液性囊腺瘤、43例漿液性囊腺癌)。20例對照組正常卵巢來自山東大學齊魯醫(yī)院、山東大學第二醫(yī)院、濟南市中心醫(yī)院婦科接受手術(shù)切除卵巢的非卵巢性疾病患者。臨床及病理資料調(diào)查來自43例漿液性囊腺癌患者，生存資料來自43例漿液性囊腺癌中的32位患者，疾病特異性生存時間是從手術(shù)時至因卵巢癌死亡或至調(diào)查時。2分別利用RTPCR和免疫組化方法檢測漿液性囊腺癌、漿液性囊腺

3、瘤及正常卵巢組織中PDCD4mRNA和蛋白的表達情況。3采用卡方檢驗方法分析漿液性囊腺癌與正常卵巢、漿液性囊腺瘤組織中PDCD4表達的差異，采用卡方檢驗方法分析PDCD4表達與漿液性囊腺癌患者臨床病理學特點的關(guān)系；采用KaplanMeier和Logrank檢驗分析PDCD4表達與患者疾病特異性生存時間的關(guān)系；采用Cox回歸進行多因素分析確定PDCD4表達是否為漿液性囊腺癌患者獨立的預(yù)后因素，若P值小于005fllJ認為差別具有統(tǒng)計學意義

4、。二、PI)CD4對上皮性卵巢癌細胞惡性行為影響的實驗研究1按常規(guī)培養(yǎng)人上皮性卵巢癌細胞系SKOV3，3AO及CA03，利用帶有紅色熒光的真核表達載體pDsRed2N1(空載體)及pDsRed2N1PDCD4(PDCD4重組表達載體1分別轉(zhuǎn)染上述細胞，并利用未轉(zhuǎn)染的相應(yīng)細胞作為對照；利用熒光顯微鏡觀察、RTPCR及Westernblot技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染的效果。對于SKOV3細胞，利用30099／mL的G418篩選轉(zhuǎn)染陽性的克隆，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染