殼聚糖酶的特性及其固定化研究.pdf_第1頁(yè)
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1、產(chǎn)殼聚糖酶假單胞菌(Pseudonomus)CUY8發(fā)酵粗酶液經(jīng)冰冷丙酮以(v/v)10：3的比例沉淀，Sephadex G-25和Sephadex G-100凝膠過(guò)濾層析，分離純化后，得到兩種純化的殼聚糖酶，即殼聚糖酶Ⅰ和Ⅱ。本課題重點(diǎn)研究殼聚糖酶Ⅰ。經(jīng)純化后該酶的比活力為160.00U/mg，純化7.52倍。該酶的最適pH和最適溫度分別為5.0和55℃，熱穩(wěn)定性范圍在20℃-50℃，Km值為1.919 mg/mL。金屬離子Sn<'2

2、+>，Ag<'+>，Zn<'2+>，Mn<'2+>，Al<'3->，Pb<'2+>等對(duì)酶有抑制作用。有機(jī)試劑EDTA和硫脲對(duì)該酶活力有促進(jìn)作用。SDS和巰基乙醇強(qiáng)烈抑制該酶酶活。 同時(shí)本課題采用吸附交聯(lián)法以幾丁質(zhì)為載體和包埋法以海藻酸鈉-纖維素為載體固定殼聚糖酶。吸附交聯(lián)固定化最佳條件為：5％戊二醛溶液、游離酶添加量達(dá)到2.0mg/0.1g幾丁質(zhì)載體、固定化時(shí)間8小時(shí)；包埋法固定化最佳條件為：游離酶添加量為2.0g/10mL1％

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