miR-374b-5p對(duì)裸鼠人胃癌種植瘤的影響及其靶基因RECK的研究.pdf

1、目的:
　　通過裸鼠人胃癌種植瘤模型，探討miR-374b-5p及其靶基因RECK在胃癌生長、侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用。
　　方法:
　　1.培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株MGC-803，使用BABL/c裸鼠建立人胃癌種植瘤動(dòng)物模型。
　　2.隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組(體內(nèi)轉(zhuǎn)染無義序列，NC-inhibitor)和miR-374b-5p抑制組(體內(nèi)轉(zhuǎn)染miR-374b-5p抑制劑，Hsa-micro-374b-5p in

2、hibitor)，觀察腫瘤生長情況，HE染色觀察種植瘤標(biāo)本的病理學(xué)特征。
　　3.采用qRT-PCR檢測三組裸鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)染后人胃癌種植瘤組織的miR-374b-5p表達(dá)水平；熒光素酶活性檢測驗(yàn)證miR-374b-5p是否通過靶向作用RECK對(duì)其表達(dá)進(jìn)行調(diào)控；qRT-PCR、免疫組織化學(xué)分別檢測三組裸鼠人胃癌種植瘤RECK的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1. miR-374b-5p抑制組種植瘤生長較空白

3、對(duì)照組和陰性對(duì)照組種植瘤生長緩慢。
　　2. miR-374b-5p抑制組的病理學(xué)檢測提示種植瘤的惡性程度較空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組下降。
　　3. miR-374b-5p抑制組種植瘤的miR-374b-5p表達(dá)水平較空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組明顯降低。
　　4.熒光素報(bào)告載體系統(tǒng)證實(shí)RECK是miR-374b-5p直接調(diào)控的靶基因。
　　5. miR-374b-5p抑制組種植瘤的RECK轉(zhuǎn)錄水平及蛋白表達(dá)水平較空白對(duì)