中藥甘松揮發(fā)油對正常及肥厚大鼠心室肌細(xì)胞延遲整流鉀電流(Ik)的影響.pdf

1、目的:觀察不同濃度中藥甘松揮發(fā)油對正常大鼠和左室肥厚大鼠心室肌細(xì)胞膜延遲整流鉀電流(delayed rectifier K+ current，Ik)的作用，及甘松揮發(fā)油對正常大鼠和肥厚心室肌細(xì)胞Ik的量效曲線、電流-電壓(I-V)曲線、激活曲線和失活曲線的影響，探討中藥甘松揮發(fā)油抗心律失常作用的離子機(jī)制。
　　方法:1、動物模型制備:采用腹主動脈部分縮窄法誘導(dǎo)左心室肥厚模型。將大鼠麻醉后開腹，分離腹主動脈和腎動脈后，在腎動脈上方約

2、1cm處的腹主動脈，用7號注射針頭緊貼腹主動脈，用4號手術(shù)絲線將二者一起結(jié)扎，抽出針頭，使腹主動脈狹窄約60-70％。
　　2、手術(shù)第4周超聲檢查大鼠左室長軸切面、腹主動脈的長軸切面、室間隔舒張末期厚度(IVSTd)及左室后壁舒張末期厚度(LVPWTd)。
　　3、用急性酶解分離法分離大鼠左心室心肌細(xì)胞，剪下左室游離壁肌組織塊置于KB液中充分剪碎、輕柔吹打，用200目尼龍網(wǎng)過濾，獲得的細(xì)胞置于KB液中室溫下孵育1-2小時。<

3、br>　　4、采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄正常及肥厚大鼠心室肌細(xì)胞Ik，分別測定Ik的量效曲線、電流-電壓(I-V)曲線、激活曲線和失活曲線，觀察不同濃度的甘松揮發(fā)油對正常及肥厚大鼠心室肌細(xì)胞膜Ik的影響。
　　結(jié)果:
　　甘松揮發(fā)油對正常心室肌細(xì)胞Ik的影響
　　1.甘松揮發(fā)油可呈濃度依賴性抑制正常大鼠心室肌細(xì)胞膜Ik峰值電流(peakcurrent)。在測試脈沖電壓為+50mV時，甘松揮發(fā)油濃度為1μg/g、3μg/g

4、、5μg/g、10μg/g、20μg/g和50μ/g對Ik峰值電流的抑制率分別為:（10.45±1.14）％，(20.18±2.54)％，（46.88±5.3）％，（78±9.2）％，（96±6.4）％和（98±5.6）％(n=5，P＜0.05)。
　　2.甘松揮發(fā)油對正常大鼠Ik的電流密度-電壓關(guān)系曲線(current densityvoltage-curve，I-V曲線)的影響:在測試脈沖電壓為-90mV時，5μg/g甘松揮發(fā)

5、油使Ik峰值電流從(9.43±0.62)pA/pF減少到(5.18±0.33)pA/pF(n=5，P＜0.05)，給藥后Ik峰值電流密度減少約45％，給藥前后電流密度變化有統(tǒng)計學(xué)意義。I
　　3.甘松揮發(fā)油對正常大鼠Ik激活動力學(xué)的影響:在甘松揮發(fā)油5μg/g灌流法給藥后，激活曲線顯示給藥前后半數(shù)激活電壓(V1/2)為:(23.65±0.65)mV VS(28.19±0.57)mV(n=6，P＜0.05);斜率因子(S)為:（6.

6、09±0.56）VS(5.14±0.51)mV(P＜0.05，n=6)。給藥前后半數(shù)激活電壓和斜率因子變化有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.甘松揮發(fā)油對正常大鼠Ik失活動力學(xué)的影響:甘松揮發(fā)油使失活曲線明顯左移，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義:給藥前后半數(shù)失活電壓(V1/2)為(-64.46±1.02)mV VS(-82.84±1.27) mV(n=6，P＜0.05);斜率因子(S)為:(14.40±1.03)mV vs(13.35±1.064)mV

7、(n=6,P＜0.05)
　　甘松揮發(fā)油對肥厚心室肌細(xì)胞Ik的影響
　　1.甘松揮發(fā)油可呈濃度依賴性抑制肥厚大鼠心室肌細(xì)胞膜Ik峰值電流(peakcurrent)。在測試脈沖電壓為+50mV時，甘松揮發(fā)油濃度為1μg/g、3μg/g、5μg/g、10μg/g、20μg/g和50μg/g對Ik峰值電流的抑制率分別為:（2.52±0.34）％，(12.88±1.13)％，(16.58±2.32)％，(37.67±5.12)％，(

8、47.58±6.64)％和(60.12±7.08)％(n=5，P＜0.05)。
　　2.甘松揮發(fā)油對肥厚大鼠Ik的電流密度-電壓關(guān)系曲線(current densityvoltage-curve，I-V曲線)的影響:在測試脈沖電壓為-90mV時，5μg/g甘松揮發(fā)油使肥厚大鼠Ik峰值電流從(5.64±0.38)pA/pF減少到(4.71±0.44)pA/pF(n=5，P＜0.05)，給藥后Ik峰值電流密度減少約16.5％，給藥前后

9、電流密度變化有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.甘松揮發(fā)油對肥厚大鼠Ik激活動力學(xué)的影響:在甘松揮發(fā)油5μg/g灌流法給藥后，激活曲線顯示給藥前后半數(shù)激活電壓(V1/2)為:(23.04±0.68)mV VS(26.04±0.62)mV(n=6，P＜0.05);斜率因子(S)為:（6.44±0.6）VS(5.54±0.52)mV(P＜0.05，n=6)。給藥前后半數(shù)激活電壓和斜率因子變化有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.甘松揮發(fā)油對Ik失活動力學(xué)

10、的影響:失活曲線顯示甘松揮發(fā)油使失活曲線明顯左移，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義:給藥前后半數(shù)失活電壓(V1/2)為(-68.01±1.94) mV VS(-75.92±1.72) mV(n=6，P＜0.05);斜率因子(S)為:(15.26±1.95)mV vs(12.34±1.56)mV(n=6,P＜0.05)
　　結(jié)論:
　　1.甘松揮發(fā)油可呈濃度依賴性抑制正常大鼠心室肌細(xì)胞膜Ik電流，隨著濃度增加阻斷作用增強(qiáng);
　　2.

11、甘松揮發(fā)油可使正常大鼠心室肌細(xì)胞Ik的電流-電壓曲線(I-V曲線)下移;
　　3.甘松揮發(fā)油對正常大鼠心室肌細(xì)胞Ik激活曲線(activation curve)右移;
　　4.甘松揮發(fā)油對正常大鼠心室肌細(xì)胞Ik失活曲線(inactivation curve)左移;
　　5.甘松揮發(fā)油可濃度依賴性抑制肥厚大鼠心室肌細(xì)胞膜Ik電流;使其電流-電壓曲線(I-V曲線)下移;使其激活曲線右移;失活曲線左移。同濃度的甘松揮發(fā)油對肥