霉酚酸酯和雷帕霉素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、研究目的： 肝缺血再灌注損傷(ischemiareperfusioninjury，I/Rinjury)是導(dǎo)致早期移植物失功的最常見原因之一，同時(shí)也是影響肝臟移植術(shù)后移植物長期存活的一個主要危險(xiǎn)因素。而且對于逐漸廣泛開展的邊緣性供肝和活體供肝肝臟移植來說，由于供肝肝功能貯備相對較低，導(dǎo)致對缺血缺氧的耐受性更差，如何減輕肝臟缺血再灌注損傷已經(jīng)成為此類供肝面臨的主要問題。由于器官移植必然伴隨有缺血再灌注損傷，而免疫抑制劑的使用對器官移

2、植來說也同樣不可避免，因此免疫抑制劑對器官缺血再灌注損傷的影響越來越受到國內(nèi)外研究者的重視。近年來，霉酚酸酯和雷帕霉素被越來越多的應(yīng)用于臨床肝臟移植的免疫抑制方案中。因此，深入研究霉酚酸酯和雷帕霉素對肝臟缺血再灌注損傷的影響并進(jìn)一步探討和闡明其作用機(jī)理，不僅能增進(jìn)我們對肝臟缺血再灌注損傷機(jī)制的理解，同時(shí)也對肝臟移植術(shù)后免疫抑制劑的選擇和使用具有重要的臨床指導(dǎo)意義。 研究方法： 通過大鼠肝臟缺血再灌注模型以及大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)

3、胞缺氧模型、原代大鼠肝竇內(nèi)皮分離及厭氧培養(yǎng)模型，使用活體熒光、real-timePCR、westernblot等方法，研究了霉酚酸酯和雷帕霉素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷后肝臟損傷、氧自由基活化、肝臟再生等方面的作用，同時(shí)重點(diǎn)分析霉酚酸酯及雷帕霉素對肝臟缺血再灌注后微循環(huán)改變的影響，并從粘附分子以及相關(guān)信號轉(zhuǎn)道通路等方面初步探討其可能的作用機(jī)制。 研究結(jié)果： 本研究證實(shí)，大鼠肝臟缺血再灌注損傷時(shí)，粘附分子ICAM-1和VCA

4、M-1在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)均有明顯上調(diào)，并進(jìn)一步介導(dǎo)了白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附反應(yīng)，導(dǎo)致肝臟微循環(huán)紊亂，造成肝功能受損。霉酚酸酯和雷帕霉素干預(yù)治療不僅能夠抑制缺血再灌注損傷后的氧自由基活化，同時(shí)能夠分別通過下調(diào)MAPKs通路和mTOR通路的磷酸化來抑制粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)水平，從而緩解缺血再灌注引起的炎性細(xì)胞粘附聚集和肝竇微循環(huán)障礙。 研究結(jié)論： 霉酚酸酯和雷帕霉素能夠有效緩解肝臟缺血再灌注