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文檔簡介
1、目的:研究日本血吸蟲卵對2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzesulfonic acid,TNBS)誘導小鼠結(jié)腸炎模型脾臟調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cells,Treg)、調(diào)節(jié)性B細胞(regulatory B cells,Breg)表達水平影響并探討其機制。
方法:BALB/c小鼠(n=60)隨機分成四組:正常對照組(ctrl組,n=10)、血吸蟲卵組(TNBS-OVA+組,n=10)
2、、TNBS組(TNBS+OVA-組,n=20)、TNBS+血吸蟲卵組(TNBS+OVA+組,n=20)。TNBS-OVA+組及TNBS+OVA+組小鼠在實驗開始的第2、9天分別給予腹腔注射冰凍滅活日本血吸蟲卵15000個(1ml冰生理鹽水混懸液),ctrl組及TNBS+OVA-組同時給予相同體積的冰生理鹽水腹腔注射。在實驗開始第11天TNBS+OVA-組及TNBS+OVA+組小鼠予TNBS溶液3mg/只灌腸建立結(jié)腸炎模型,期間觀察四組小
3、鼠的活動狀況。建立結(jié)腸炎模型后6天(即實驗開始第17天)處死存活小鼠,觀察四組小鼠結(jié)腸的大體形態(tài)、同時用流式細胞儀測定小鼠脾臟中的CD4+CD25+細胞(Treg)、CD19+IL-10+細胞(IL-10+的Breg細胞)和CD19+TGF-β+細胞(TGF-β+的Breg細胞)的表達水平。
結(jié)果:(1)與TNBS+OVA-組死亡率35%相比,TNBS+OVA+組小鼠死亡率為15%,死亡率明顯下降(P<0.05)。與TNBS+
4、OVA-組相比,TNBS+OVA+組小鼠結(jié)腸肉眼炎癥程度明顯減輕。(2)經(jīng)血吸蟲卵作用后,TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中Treg細胞比例較ctrl組顯著增加(7.24±0.14%vs5.53±2.29%,P<0.05),TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中Treg細胞比例較TNBS+OVA-組顯著增加(6.56±3.79%vs4.91±0.94%,P<0.05)。(3)經(jīng)血吸蟲卵作用后,TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+細
5、胞比例較ctrl組顯著降低(21.07±5.86%vs73.64±7.40%,P<0.05):TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+細胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(9.21±1.47%vs74.19±9.87%,P<0.05)。另,TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+Breg細胞比例較ctrl組顯著降低(21.03±5.45%vs44.16±3.48%,P<0.05);TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中IL-1
6、0+Breg細胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(8.69±1.54%vs40.55±4.07%,P<0.05)。(4)經(jīng)血吸蟲卵作用后,TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+細胞比例較ctrl組顯著降低(60.71±12.64%vs96.95±1.34%,P<0.05);TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+細胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(68.59±9.90%vs97.57±0.97%,P<0.05)。另,
7、TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+Breg細胞比例較ctrl組顯著降低(16.81±3.28%vs43.68±2.83%,P<0.05);TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+Breg細胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(7.24±5.0%vs48.41±3.98%,P<0.05)。
結(jié)論:
(1)日本血吸蟲卵能促進Treg細胞的表達,從而改善炎癥性腸病的嚴重程度。
(2)本實驗暫無法
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