田基黃抗缺氧活性成分的研究.pdf

1、本課題組通過對采自云南、廣西和四川等地區(qū)的1000多種中藥及藥用植物提取物進行了抗缺氧活性測試，從中篩選出4種在體內(nèi)體外均具有較強抗缺氧活性的植物。本文對其中一種植物田基黃(Hypericumjaponicum Thunb．Ex Murray)進行了抗神經(jīng)細胞缺氧活性成分的追蹤研究。田基黃為藤黃科金絲桃屬植物地耳草(Hypericumjaponicum Thunb．Ex Murray)的全草，又名地耳草，產(chǎn)于廣東、廣西、四川、湖南、福建

2、、江西等地。用于治療傳染性肝炎、瀉痢、小兒驚風、疳積、腸癰、蛇咬傷等疾病。 本研究采用密閉小鼠缺氧損傷體內(nèi)模型和PC12細胞(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤克隆化細胞株)缺氧損傷體外模型對田基黃(HypericumjaponicumThunb．exMurray)60％乙醇提取物及該提取物的氯仿萃取部分、乙酸乙酯萃取部分、正丁醇萃取部分和剩余水層進行了抗缺氧活性測試，確定抗缺氧的活性部位為乙酸乙酯萃取部分。 利用硅膠柱色譜、ODS柱

3、色譜、SephadexLH-20柱色譜及制備HPLC等多種色譜分離手段，對田基黃(HypericumjaponicumThunb．exMurray)60％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分進行了系統(tǒng)的分離，得到34個化合物。利用顯色反應和光譜學(UV、IR、MS和NMR)的方法對其中31個化合物進行了結構鑒定，分別為：豆甾醇(stigmasterol)(1)、β-胡蘿卜苷(daucosterin)(2)、bijaponicaxanthone(

4、3)、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷(quercetin-7-O-α-L-rahmnoside)(4)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(quercetin-3-O-α-L-rahmnoside)(5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucoside)(6)、4，6-dimethyl，1-O-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl]multi

5、fidol(7)*、原兒茶酸(protocatechuicacid)(8)、沒食子酸(gallicacid)(9)、槲皮素(quercetin)(10)、山柰酚(kaempferol)(11)、3-O-甲基槲皮素(3-O-methylquercetin)(12)、木樨草素-7-O-蕓香糖苷(luteolin-7-O-rutinoside)(13)、芹菜素(apigenin)(14)、5，7，4’-三羥基-3’-甲氧基黃酮(5，7，4’-

6、trihydroxy-3’-methoxyflavone)(15)、3’，4’-二甲氧基-5，7-二羥基黃酮(3’，4’-dimethoxy-5，7-dihydroxyflavone)(16)、對羥基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid)(17)、(2E)-二氫山柰酚((2E)-dihydrokaempferol)(18)、(2E)-二氫槲皮素((2E)-dihydroquercetin)(19)、5，7，3’，4’-四羥基

7、二氫黃酮(5，7，3’，4’-tetrahydroxyflavanone)(20)、反式對羥基桂皮酸(p-hydroxycinnamicacid)(21)、5，4’-二羥基-7-甲氧基二氫黃酮(5，4’-dihydroxy-7-methoxyflavanone)(22)、(2E)-3，5，3’，4’-四羥基-7-甲氧基二氫黃酮((2E)-3，5，3’，4’-tetrahydroxy-7-methoxyflavanone)(23)、(22

8、)-二氫槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷((22)-dihydroquercetin-3-O-α-L-rahmnoside)(24)、綠原酸(chlorogenicacid)(25)、4-O-β-D-葡萄糖香豆酸(4-O-β-D-glucosylcoumancacid)(26)、1，5-二羥基-8-甲氧基雙苯吡酮(1，5-dihydroxy-8-methoxyxanthone)(27)、1，7-二羥基-4-甲氧基雙苯吡酮(1，7-dih

9、ydroxy-4-methoxyxanthone)(28)、3，7-二羥基-1，2-二甲氧基雙苯吡酮(3，7-dihydroxy-1，2-dihymethoxyxanthone)(29)、3，6-二羥基-1，2，7-三甲氧基雙苯吡酮(3，6-dihydroxy-1，2，7-trihymethoxyxanthone)(30)、1，4，7-三羥基-3-甲氧基雙苯吡酮(1，4，7-trihydroxy-3-hymethoxyxanthone)

10、(31)。其中二氫黃酮類化合物6個：化合物18、19、20、22、23、24；黃酮類化合物10個：化合物4、5、6、10、11、12、13、14、15、16；雙苯吡酮類化合物6個：化合物3、27、28、29、30、31；酚酸類化合物7個：化合物7、8、9、17、21、25、26；其他化合物2個：化合物1、2；化合物7為新化合物；化合物8、12、18、19、24、25、29、30為首次從該植物中分離得到。 采用PC12細胞缺氧損傷

11、作用的體外活性測試方法對田基黃分離得到的部分單體進行抗缺氧活性測試。研究發(fā)現(xiàn)，化合物4、5、8、9、10、12、15顯示了較好的活性，其中化合物4、5、10、12和15為黃酮類化合物；化合物8和9為酚酸類化合物。 采用DPPH法對田基黃分離得到的部分單體化合物進行DPPH自由基清除能力的考察。結果顯示，化合物8、10、18、19、25顯示出和Vc基本相當?shù)幕钚?，其中化合?和25為酚酸類化合物；化合物10為黃酮類化合物；化合物1