脂聯(lián)素通過促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的遷移和增殖及抑制其凋亡從而促進(jìn)脂肪組織創(chuàng)面愈合的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^研究脂聯(lián)素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞系的增殖、遷徙和凋亡的影響,初步闡明脂聯(lián)素促進(jìn)脂肪組織創(chuàng)面愈合的作用及機(jī)制,為手術(shù)切口并發(fā)癥的減少及防治提供理論依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)方法：體外培養(yǎng)小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞系,誘導(dǎo)分化后用油紅“O”染色方法進(jìn)行鑒定。應(yīng)用免疫組化及逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)前脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素受體的表達(dá)。以不同濃度梯度的脂聯(lián)素干預(yù)培養(yǎng)的3T3-L1前脂肪細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組不加脂聯(lián)素。小鼠脂聯(lián)素Elisa檢

2、測(cè)法測(cè)定細(xì)胞自身分泌脂聯(lián)素的濃度。應(yīng)用MTT/傷口愈合模型研究不同濃度脂聯(lián)素對(duì)前脂肪細(xì)胞增殖和遷徙的影響,且應(yīng)用Annexin-V-FITC凋亡檢測(cè)法測(cè)定其凋亡率的變化。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：脂聯(lián)素受體可在小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞中表達(dá)。細(xì)胞遷徙及增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組的增殖和遷徙速率明顯大于對(duì)照組(P<0.05);隨著脂聯(lián)素濃度的提高,細(xì)胞增殖和遷移的活性逐漸增大,當(dāng)脂聯(lián)素濃度達(dá)到25ug/ml時(shí),促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷徙能力達(dá)到最強(qiáng)。細(xì)