臨床分離耐甲氧西林溶血葡萄球菌(MRSH)的耐藥性及分子流行病學(xué)研究.pdf

1、第一部分臨床分離溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株（MRSH）及耐藥性的檢測
　　 凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase-negative Staphylococcus，CNS）是醫(yī)院感染的重要病原菌之一，近年來的檢出率不斷提高。溶血葡萄球菌（Staphylococcus haemolyticus，SH）在凝固酶陰性葡萄球菌中較為常見，檢出率一般僅次于表皮葡萄球菌，在某些地區(qū)檢出率甚至位列第一。耐甲氧西林溶血葡萄球菌（methici

2、llin-resistant Staphylococcus haemolyticus，MRSH）的出現(xiàn)及其快速進(jìn)化、演變、傳播、流行給臨床治療帶來極大的困難。MRSH對臨床常用的多種抗菌藥物具有耐藥特征，但對糖肽類抗生素（Glycopeptides）仍然顯示敏感，這類抗菌藥物的大量應(yīng)用，已導(dǎo)致了對糖肽類抗菌藥物耐藥葡萄球菌的出現(xiàn)。為了更好地指導(dǎo)臨床用藥，我們對安徽省部分醫(yī)院臨床分離的溶血葡萄球菌中MRSH菌株及其耐藥性進(jìn)行了檢測和分析。

3、
　　 目的：了解安徽省部分醫(yī)院臨床分離的溶血葡萄球菌的耐藥性和耐甲氧西林菌株的發(fā)生率，為臨床合理應(yīng)用抗菌藥物提供依據(jù)。
　　 方法：收集安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院、安徽省立醫(yī)院、皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院、淮北市人民醫(yī)院及舒城縣人民醫(yī)院等14家醫(yī)院2005年臨床分離的溶血葡萄球菌共103株。按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）200

4、8年標(biāo)準(zhǔn)，以頭孢西丁紙片法及mecA-PCR法檢測MRSH，采用瓊脂稀釋法檢測其對常用抗菌藥物的耐藥性。
　　 結(jié)果：103株溶血葡萄球菌中，以頭孢西丁紙片法及mecA-PCR法，MRSH的檢出率分別為86.4％、80.6％，兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。MRSH對萬古霉素及替考拉寧極其敏感，未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株；對青霉素、環(huán)丙沙星的耐藥率＞80％；對頭孢唑啉、頭孢呋辛、頭孢曲松、克林霉素的耐藥率＞50％；對阿米卡星、四環(huán)素、利福

5、平、氯霉素的耐藥率分別為16.9％、48.2％、12.0％、31.3％。除阿米卡星、四環(huán)素、利福平和氯霉素外，MRSH對其他抗菌藥物的耐藥率顯著高于甲氧西林敏感菌株（methicillin-susceptible Staphylococcus haemolyticus，MSSH），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：MRSH對絕大多數(shù)抗菌藥物呈現(xiàn)高度耐藥；對糖肽類抗菌藥物仍十分敏感，未發(fā)現(xiàn)對糖肽類耐藥的溶血葡萄球菌。

6、頭孢西丁紙片法和mecA-PCR法檢測MRSH無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。MRSH的檢出率高達(dá)80％以上，除阿米卡星、四環(huán)素、利福平和氯霉素外，MRSH對其他抗菌藥物的耐藥率均顯著高于MSSH（P＜0.05＝，臨床應(yīng)加強(qiáng)檢測及監(jiān)測。
　　 第二部分臨床分離溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株（MRSH）的SCCmec分型及同源性分析
　　 近年來，臨床分離的溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株（MRSH）的檢出率越來越高，許多地區(qū)報(bào)道

7、已超過80％，耐甲氧西林菌株已經(jīng)成為了全世界醫(yī)院感染的重要病原菌。MRSH對臨床常用的多種抗菌藥物耐藥，目前其有效治療藥物主要為糖肽類抗生素：萬古霉素、替考拉寧及唑烷酮類抗生素：利奈唑胺。MRSH耐藥的主要機(jī)制是菌株攜帶了mecA基因，該基因位于新型的可移動(dòng)元件SCCmec (Staphylococcal Cassette Chromosomemec mec，SCCmec)基因盒上，該基因盒不僅攜帶mecA基因，往往還攜帶有其他抗菌藥的

8、耐藥基因，從而形成多重耐藥。目前已發(fā)現(xiàn)5種SCCmec基因型，即SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ。其中SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ型多為醫(yī)院獲得性（HA-MRS），SCCmecⅣ、Ⅴ型多為社區(qū)獲得性（CA-MRS）。為了了解安徽省臨床分離MRSH的SCCmec分型及同源性，我們進(jìn)行了相關(guān)的研究，并報(bào)道如下。
　　 目的：了解臨床分離MRSH的SCCmec分型以及不同型別之間的耐藥性差異情況，并對不同SCCmec型別的MRSH進(jìn)行同源性分

9、析。
　　 方法：根據(jù)文獻(xiàn)，合成引物，多重PCR進(jìn)行SCCmec分型，ERIC-PCR法對不同SCCmec型別菌株進(jìn)行同源性分析。
　　 結(jié)果：1）多重PCR檢測SCCmec分型：83株MRSH臨床分離菌株中，SCCmecⅠ型23株（27.7％），SCCmecⅡ型10株（12.1％），SCCmecⅢ型24株（28.9％），SCCmecⅣ型1株（1.2％），Ⅰ、Ⅱ混合型8株（9.6％），Ⅰ、Ⅲ混合型6株（7.2％），Ⅱ、Ⅲ

10、混合型5株（6.0％），Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合型3株（3.6％），未分型3株（3.6％）；2）不同SCCmec型別菌株的耐藥性分析：SCCmecⅠ、Ⅲ型菌株對頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢曲松的耐藥率顯著高于Ⅱ型菌株，Ⅱ型菌株對氯霉素的耐藥率高于Ⅰ、Ⅲ型菌株（P＜0.05）；3）不同SCCmec型別菌株的同源性分析：23株SCCmecⅠ型分為11型，其中A型5株，B型5株，C型3株，其余8株各為1型，2株未分型；10株SCCmecⅡ型分為6型，其中D