葡萄球菌對(duì)常用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、克林霉素的耐藥性及耐藥基因和分子流行病學(xué)研究.pdf

1、引言： 大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)(Macrolides)、林可酰胺類(lèi)(Lincosamides)、鏈陽(yáng)菌素類(lèi)(Streptogramins)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)不同但功能相近的藥物，合稱(chēng)為MLS藥物。常用于葡萄球菌感染的治療，隨著該類(lèi)藥物臨床應(yīng)用的增多，近年來(lái)葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)的耐藥越來(lái)越嚴(yán)重。在葡萄球菌中最主要的，也是最早發(fā)現(xiàn)的耐藥機(jī)制是由紅霉素核糖體甲基化酶(erythromycin ribosome methylase，erm)基因

2、介導(dǎo)的修飾MLS藥物在核糖體上的作用位點(diǎn)，其次是msrA(macrolidestreptogramins resistance)基因介導(dǎo)的主動(dòng)外排機(jī)制。且細(xì)菌耐藥性可以通過(guò)垂直或水平傳播等方式進(jìn)行播散。本研究通過(guò)對(duì)安徽省部分醫(yī)院金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)抗菌藥物的耐藥性的分析，對(duì)常見(jiàn)耐藥基因的檢測(cè)，及耐藥菌株DNA指紋圖譜的構(gòu)建，了解了本地區(qū)葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗菌藥物的耐藥情況，探討了細(xì)菌耐藥的分子生物學(xué)機(jī)制

3、及分子流行病學(xué)特征，為本地區(qū)開(kāi)展葡萄球菌感染的防治、耐藥的監(jiān)測(cè)、傳染源的追蹤及傳播途徑調(diào)查等工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 目的：了解安徽省部分醫(yī)院金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)抗菌藥物的耐藥性，以指導(dǎo)臨床合理用藥。了解金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)抗菌藥物的常見(jiàn)耐藥基因型別。了解耐藥菌株分子流行病學(xué)特征。 方法： 采用M-H瓊脂稀釋法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委

4、員會(huì)(CLSL/NCCLS2006版)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。按照CLSL/NCCLS2006版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行雙紙片法D試驗(yàn)。用PCR法檢測(cè)目的基因。ERIC-PCR法進(jìn)行分子流行病學(xué)研究。 結(jié)果： 328株葡萄球菌對(duì)臨床常用4種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗菌藥物高度耐藥，金葡菌總耐藥率為84.5％，其中MRSA的耐藥率為92.8％，MSSA為75.9％；表葡菌總耐藥率為99.0％，其中MRSE的耐藥率為99.8％，MSSE為96.3％；各耐藥率有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)差異。 185株金葡菌中表現(xiàn)對(duì)紅霉素和克林霉素敏感或中介20株(10.8％)；對(duì)紅霉素和克林霉素均耐藥(cMLSB型)139株(75.1％)；對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感，D試驗(yàn)陽(yáng)性(iMLSB型)9株(4.9％)；對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感，D試驗(yàn)陰性(MS型)10株(5.4％)；對(duì)紅霉素敏感或中介而克林霉素耐藥7株(3.9％)。143株表葡菌中cMLSB型耐藥139株(97.2％)，MS型耐藥2株(1.4％)，無(wú)iMLSB型

6、耐藥株，紅霉素敏感而克林霉素耐藥有2株(1.4％)。 對(duì)紅霉素耐藥而對(duì)克林霉素敏感的19株金黃色葡萄球菌中，D試驗(yàn)陽(yáng)性9株，占46.8％；對(duì)紅霉素耐藥而對(duì)克林霉素敏感的表皮葡萄球菌2株，D試驗(yàn)陰性。 158株紅霉素耐藥金葡菌中，ermA、ermB、ermC、msrA基因的陽(yáng)性率分別為3.2％、7.0％、39.9％、7.0％；141株紅霉素耐藥表葡菌中，ermA、ermB、ermC、msrA基因的陽(yáng)性率分別為2.8％、2.