甲腫消對(duì)甲狀腺細(xì)胞凋亡及甲狀腺激素合成相關(guān)蛋白的影響.pdf

1、甲狀腺功能亢進(jìn)癥是由甲狀腺激素分泌過(guò)多所致的一種內(nèi)分泌疾病，其中最常見(jiàn)的是彌漫性甲狀腺腫伴甲亢(GD)，約占全部甲亢病的90％[1]。GD的病因和發(fā)病機(jī)理尚不明了，但目前一般均認(rèn)為是一種器官特異的自身免疫性疾病，有體液免疫與細(xì)胞免疫參與發(fā)病，是多基因、多因素的遺傳性疾病[2]本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究化痰散結(jié)中藥甲腫消對(duì)甲狀腺細(xì)胞凋亡、甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)活性、甲狀腺激素合成相關(guān)蛋白TPO、甲狀腺球蛋白(TG)、鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)基因表達(dá)及

2、蛋白表達(dá)的影響，闡述甲腫消作用于甲狀腺細(xì)胞的機(jī)理，從而為甲腫消治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥提供理論依據(jù)。
　　中醫(yī)治療甲狀腺腫大有幾千年的歷史，化痰散結(jié)法為其基本治法?；瞪⒔Y(jié)中藥分為含碘類和非含碘類兩種，含碘類藥物，如昆布、海藻等常用來(lái)治療地方性甲狀腺腫、甲狀腺結(jié)節(jié)等單純性甲狀腺腫大；非含碘類中藥，如夏枯草、醋山甲、浙貝母、白僵蠶等可以用來(lái)治療自身免疫性甲狀腺疾病，但是，臨床對(duì)此報(bào)道較少。甲腫消由多種非富碘化痰散結(jié)中藥組成，是吾師劉喜明

3、治療甲狀腺腫大的臨床效驗(yàn)方。劉主任帶領(lǐng)的糖尿病研究室成功的完成了兩次國(guó)家自然基金，研究甲腫消治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥機(jī)制，充分證明了甲腫消治療自身免疫性甲狀腺疾病的效果。
　　甲狀腺腫大是由于各種原因?qū)е碌募谞钕偌?xì)胞動(dòng)力學(xué)異常，細(xì)胞增殖與凋亡平衡失調(diào)，增殖>凋亡[3-5]。近年來(lái)，許多研究從甲狀腺細(xì)胞凋亡角度研究化痰散結(jié)中藥療效和作用機(jī)制，都一致認(rèn)為富碘化痰散結(jié)中藥有促進(jìn)甲狀腺細(xì)胞凋亡的作用，且有量效-時(shí)效關(guān)系[6、7]但對(duì)非富碘化痰

4、散結(jié)中藥與凋亡的關(guān)系研究較少。
　　甲狀腺濾泡細(xì)胞在合成和分泌甲狀腺激素的過(guò)程中，以下三種蛋白執(zhí)行重要功能。鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體是一種糖化膜蛋白，位于甲狀腺濾泡細(xì)胞的基底膜外側(cè)，負(fù)責(zé)從血液向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)碘，是甲狀腺激素合成和釋放的前提條件[8、9]。甲狀腺球蛋白是碘有機(jī)化的部位所在，碘與TG上的酪氨酸殘基結(jié)合形成碘化酪氨酸。甲狀腺過(guò)氧化物酶的作用是催化碘的有機(jī)化和碘化酪氨酸的耦聯(lián)，是甲狀腺激素合成的關(guān)鍵酶。
　　本實(shí)驗(yàn)一方面通過(guò)研究甲腫

5、消對(duì)甲狀腺細(xì)胞凋亡的影響，闡述甲腫消治療甲狀腺腫大的機(jī)理；另一方面通過(guò)研究甲腫消對(duì)甲狀腺激素合成相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響，揭示甲腫消治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥的機(jī)理。
　　實(shí)驗(yàn)按照甲腫消劑量不同，將甲狀腺細(xì)胞分為0、0.2、0.4、0.8、1.6mg/ml組，甲狀腺細(xì)胞培養(yǎng)24h后觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)、計(jì)算細(xì)胞凋亡率，改良愈創(chuàng)木酚法檢測(cè)TPO活性，反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)甲腫消對(duì)TG、TPO、NIS基因轉(zhuǎn)錄的影響，weste