小鼠乳腺細(xì)胞凋亡及瘦素對凋亡的影響.pdf

1、凋亡(apoptosis，AP)是細(xì)胞的程序性死亡(programmedcelldeath，PCD)過程。凋亡過程中，不再需要的或受損傷組織的細(xì)胞發(fā)生程序性死亡，可以說凋亡是細(xì)胞的正常死亡，同細(xì)胞的增殖發(fā)育是相反的生理過程。動物乳腺在整個(gè)發(fā)育過程中也存在著細(xì)胞增殖與凋亡的動態(tài)平衡，乳腺細(xì)胞凋亡的研究是乳腺生物學(xué)的重要組成部分，動物乳腺細(xì)胞凋亡機(jī)理的研究對揭示乳腺發(fā)育的規(guī)律，為泌乳生物學(xué)和乳腺功能調(diào)控的深入研究提供了依據(jù)。 本試驗(yàn)

2、以小鼠乳腺為材料，采用TUNEL法和毛細(xì)管電泳法系統(tǒng)地研究了小鼠乳腺正常發(fā)育過程中的細(xì)胞凋亡。結(jié)果表明小鼠乳腺發(fā)育不同時(shí)期細(xì)胞凋亡同結(jié)構(gòu)和功能發(fā)育之間相互聯(lián)系。青春期乳腺發(fā)育緩慢，結(jié)構(gòu)變化較小，乳腺細(xì)胞凋亡量相對較小，其中青春期50～60d隨著乳腺導(dǎo)管的發(fā)育，乳腺導(dǎo)管周圍的脂肪細(xì)胞凋亡量有所增加。妊娠期乳腺導(dǎo)管持續(xù)發(fā)育，乳腺中主要是脂肪細(xì)胞發(fā)生凋亡，凋亡量維持在中等水平，其中妊娠末期，乳腺腺泡大量出現(xiàn)，脂肪細(xì)胞凋亡也隨之增加。泌乳期乳腺

3、的結(jié)構(gòu)和功能最為完善，乳腺結(jié)構(gòu)變化很小，細(xì)胞凋亡量維持在很低水平。退化期隨著泌乳的結(jié)束，乳腺導(dǎo)管和腺泡結(jié)構(gòu)開始瓦解，大量細(xì)胞發(fā)生凋亡，其中退化初期乳腺細(xì)胞凋亡持續(xù)增加，退化3d達(dá)到最大值，然后凋亡量逐漸降低，此時(shí)脂肪細(xì)胞數(shù)量開始增多，占據(jù)導(dǎo)管及腺泡細(xì)胞凋亡后的位置；退化10d后乳腺已經(jīng)基本恢復(fù)到青春期狀態(tài)，凋亡細(xì)胞量也隨之減少。 試驗(yàn)中毛細(xì)管電泳檢測小鼠乳腺細(xì)胞凋亡很好地驗(yàn)證了TUNEL法檢測結(jié)果。結(jié)果顯示，小鼠乳腺在青春期、妊

4、娠期、泌乳期凋亡量都很低，退化期凋亡量顯著增加，退化3d達(dá)到凋亡高峰，而后逐漸下降。試驗(yàn)也證明了毛細(xì)管電泳是一種方便快速、靈敏度高的細(xì)胞凋亡檢測方法，有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。 瘦素是一種多靶器官、功能廣泛的蛋白激素，瘦素及其長型受體在乳腺脂肪墊和乳腺上皮細(xì)胞中都有表達(dá)，提示它對乳腺發(fā)育、泌乳和退化有一定的調(diào)控作用。本試驗(yàn)通過小鼠乳腺組織體外培養(yǎng)的方法，將退化1d的乳腺組織分別在含有瘦素和不含瘦素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后的組織分別用TUN