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1、本試驗(yàn)旨在研究熱應(yīng)激時(shí)乳蛋白含量和產(chǎn)量降低與消化率、瘤胃發(fā)酵、機(jī)體物質(zhì)代謝、泌乳相關(guān)激素、乳蛋白合成相關(guān)信號(hào)通路及乳腺細(xì)胞凋亡的關(guān)系,并從中揭示熱應(yīng)激引起乳蛋白含量和產(chǎn)量下降的原因。試驗(yàn)選取四頭泌乳日齡、體重、產(chǎn)奶量相近的經(jīng)產(chǎn)健康荷斯坦奶牛,隨機(jī)分兩組,采取2×2交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)共兩期,每期18天(其中預(yù)試期和試驗(yàn)期各9天),兩期之間間隔30天。預(yù)試期為熱中性環(huán)境,自由采食。試驗(yàn)期分熱應(yīng)激組(HS,n=2)和配對(duì)限飼組(PFTN,n=
2、2)。主要研究?jī)?nèi)容如下:
1.熱應(yīng)激對(duì)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的影響。通過(guò)分析比較熱應(yīng)激(HS)組與配對(duì)限飼(PFTN)組消化率、瘤胃發(fā)酵、機(jī)體物質(zhì)代謝之間差異發(fā)現(xiàn):(1)熱應(yīng)激降低了HS組的乳蛋白含量和產(chǎn)量,增加了 HS組消化率及尿液中尿素氮的含量;(2)熱應(yīng)激降低了 HS組血液中非酯化脂肪酸(NEFA)、血糖、總氨基酸及5種游離氨基酸的含量,增加了血漿尿素氮(BUN)的含量。
2.熱應(yīng)激對(duì)乳蛋白合成相關(guān)基因表達(dá)量及細(xì)胞凋亡
3、相關(guān)基因表達(dá)量的影響。通過(guò)分析比較熱應(yīng)激(HS)組與配對(duì)限飼(PFTN)組乳腺組織中乳蛋白合成相關(guān)調(diào)控信號(hào)通路基因表達(dá)量及乳腺組織中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)量發(fā)現(xiàn):(1)熱應(yīng)激降低了乳蛋白的含量和產(chǎn)量,而對(duì)酪蛋白氨酸激酶-2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子-5(Jak2-Stat5)信號(hào)通路及κ-酪蛋白基因(CSN3)表達(dá)量沒(méi)有影響,并且熱應(yīng)激增加了哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號(hào)通路中的mTOR的表達(dá)量,且有增加核糖體S6蛋白激酶(S6K1)
4、表達(dá)量的趨勢(shì)。(2)熱應(yīng)激增加了乳腺細(xì)胞中與細(xì)胞凋亡相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、環(huán)氧合酶-2(COX2)基因的表達(dá)量,且有增加與Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)基因表達(dá)量的趨勢(shì)。
綜上,(1)熱應(yīng)激顯著降低了乳蛋白的含量和產(chǎn)量,但是這并不能完全由(DMI)下降來(lái)解釋。熱應(yīng)激時(shí)乳蛋白合成前體物——氨基酸和血糖濃度降低,BUN及尿液中尿素氮濃度增加,NEFA濃度降低,提示熱應(yīng)激條件下乳蛋白前體物——氨基酸(而非 NEFA)
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