慢性乙型肝炎患者外周血Th17和Treg細胞及其表面CXCR3的表達.pdf

1、背景和目的
　　中國約有9300萬慢性HBV感染者,其中慢性乙型肝炎患者約2000萬例。眾所周知,乙型肝炎病毒引起不同程度的肝細胞損傷,并不是因為病毒直接殺傷肝細胞,而是由于病毒所誘導的免疫反應(yīng)。其中,CD4+T淋巴細胞可以產(chǎn)生多種細胞因子,協(xié)助各特異性和非特異性效應(yīng)細胞殺滅病毒,因而成為細胞和體液免疫反應(yīng)的重要組成部分。而IL-17+輔助性和Foxp3+調(diào)節(jié)性T淋巴細胞是最近幾年研究得比較多的對慢性乙型肝炎有重要作用的新型CD4

2、+T淋巴細胞。已有研究顯示:循環(huán)中IL-17+T(一般指Th17細胞)細胞大量聚集在慢性乙型肝炎患者的肝臟中,且表達頻率隨著肝炎程度的加重而增加;而Foxp3+T(一般指Treg細胞)細胞的功能與Th17細胞相反,它可抑制HBV抗原特異性T細胞反應(yīng),從而控制慢性乙型肝炎的進展;Th17與Treg細胞之間的平衡對慢性乙型肝炎的免疫穩(wěn)態(tài)起著至關(guān)重要的作用。而CXCR3經(jīng)典地表達于激活的人類CD4+T淋巴細胞表面,介導效應(yīng)細胞趨化至外周炎癥部

3、位和淋巴結(jié),且CXCR3的表達及其趨化因子配體IP-10也被報道與慢性乙型肝炎相關(guān);但是,目前對CXCR3表達于Th17和Treg細胞表面的模式及其免疫調(diào)節(jié)作用卻知之甚少。因此,本論文研究CXCR3在健康者以及不同程度慢性乙型肝炎患者中CD4+IL-17+T以及CD4+CD25+Foxp3+T淋巴細胞表面的表達頻率,并初步探討CXCR3+Th17和Treg細胞與肝損害之間的關(guān)系。
　　方法
　　收集不同程度慢性乙型肝炎患者以

4、及健康者外周血2ml,排除其它原因引起的急慢性肝損傷,按照2000年中華醫(yī)學會慢性乙型肝炎分級指南,分為健康對照組、輕中度慢性肝炎組、慢性重型肝炎組,提取出各組外周血中單個核淋巴細胞;利用流式細胞術(shù),分別標記上Th17和Treg細胞抗原特異性標記抗體以及CXCR3單克隆抗體,后選用FACSCalibur流式細胞儀檢測Th17、Treg細胞的比例以及其表面CXCR3的表達,FCS4軟件進行分析;利用transwell技術(shù)分析IP-10對T

5、h17和Treg細胞的趨化作用;SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果
　　與正常對照組相比,各肝炎組的外周血中Th17和Treg細胞比例均有所增加,尤其是慢性重型肝炎組;而肝炎組的Th17細胞中CXCR3+細胞比例與健康組差異不大,但是肝炎組的Treg細胞中CXCR3+細胞比例較健康組明顯增加,尤見于慢性重型肝炎組;按照肝臟ALT水平進行分級,CXCR3+Th17和CXCR3+Treg細胞在不同級別組有明顯區(qū)別,肝臟

6、損傷越嚴重(ALT越高),CXCR3+Th17細胞和CXCR3+Treg細胞比例就越高;趨化因子IP-10濃度越大,受趨化的CXCR3+Th17和Treg細胞就會越多。
　　結(jié)論
　　慢性乙型肝炎患者外周血Th17和Treg細胞比例隨炎癥損傷程度的增加而增加;且這些免疫細胞表面CXCR3的表達在不同狀態(tài)下表達程度不一致,Th17細胞表面CXCR3的表達可以反映慢性肝炎時肝臟受損炎癥程度;配體IP-10可與CXCR3相互作用,