Statins聯(lián)合VPA協(xié)同抗AML效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、腫瘤細(xì)胞常對各種死亡誘導(dǎo)作用高度耐受,為增強(qiáng)抗癌藥物效應(yīng)并減少藥物毒副作用,選擇不同作用機(jī)制抗癌藥物聯(lián)合已成為臨床腫瘤治療的一種常用策略。他汀(Statins)是MVA代謝途徑限速酶HMGCR抑制劑,包括發(fā)酵生成的天然Statins與人工合成兩類。Statins是臨床常用降膽固醇藥物。腫瘤細(xì)胞常存在MVA代謝途徑異常,因此Statins可通過抑制腫瘤細(xì)胞MVA生成并產(chǎn)生選擇性抗腫瘤效應(yīng),是一類潛在抗癌藥物。丙戊酸(Valproic ac

2、id,VPA)為臨床常用抗癲癇藥物。作為一種組蛋白去乙酰化酶抑制劑,VPA具有抗腫瘤效應(yīng),也是一種潛在抗腫瘤藥物。本文首先觀察天然來源Simvastatin和人工合成Fluvastatin各自體外抗急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)效應(yīng);然后觀察Simvastatin和Fluvastatin分別聯(lián)合VPA體外協(xié)同抗AML效應(yīng);最后觀察可達(dá)血藥濃度的Fluvastatin聯(lián)合VPA誘導(dǎo)U937凋亡的生化

3、機(jī)制。
　　方法:
　　第1章:
　　1.用選定濃度的Simvastatin和Fluvastatin分別作用人AML細(xì)胞系U937和HL-6096小時(shí),MTT法檢測細(xì)胞存活率。
　　2.用選定濃度的Simvastatin和Fluvastatin分別作用人AML細(xì)胞系U937和HL-6096小時(shí),流式細(xì)胞術(shù)檢測Sub-G1細(xì)胞群(即凋亡細(xì)胞群)。
　　3.用選定濃度的Simvastatin和Fluvastat

4、in分別作用人AML細(xì)胞系U937和HL-6096小時(shí),倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
　　第2章:
　　1.用選定濃度的Simvastatin和Fluvastatin分別與選定濃度VPA單獨(dú)或聯(lián)合作用U937、HL-60和HL-60/ADR72小時(shí),MTT法測定細(xì)胞增殖抑制率,采用Chou-Talalay聯(lián)合指數(shù)法分析兩藥合用功效。
　　2.用選定濃度的Fluvastatin與選定濃度VPA單獨(dú)或聯(lián)合作用U937、H

5、L-60和HL-60/ADR72小時(shí),流式細(xì)胞術(shù)檢測Sub-G1群即凋亡細(xì)胞群。
　　第3章:
　　1.用選定濃度的Fluvastatin和VPA單獨(dú)或聯(lián)合作用U93772小時(shí),提取細(xì)胞總蛋白,Western blot檢測PARP、Procaspases-3、9、8剪切片段。
　　2.用選定濃度的Fluvastatin和VPA單獨(dú)或聯(lián)合作用U93772小時(shí),提取細(xì)胞總蛋白,Western blot檢測Bcl-2、Bcl

6、-xL、Mcl-1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　第1章:
　　1.Simvastatin和Fluvastatin對U937增殖抑制作用均強(qiáng)于HL-60。
　　2.Simvastatin和Fluvastatin誘導(dǎo)U937細(xì)胞凋亡比例均明顯高于HL-60。
　　3.Simvastatin和Fluvastatin誘導(dǎo)U937死亡的形態(tài)學(xué)改變均較HL-60明顯。
　　第2章:
　　1.Simvastat

7、in和Fluvastatin分別聯(lián)合VPA可協(xié)同抑制U937、HL-60和HL-60/ADR細(xì)胞增殖。
　　2.Fluvastatin分別聯(lián)合VPA可協(xié)同致U937、HL-60和HL-60/ADR細(xì)胞凋亡比例增加。
　　第3章:
　　1.Fluvastatin聯(lián)合VPA可誘導(dǎo)U937細(xì)胞中PARP、Procaspases-3、9形成明顯剪切片段。
　　2.Fluvastatin聯(lián)合VPA可誘導(dǎo)U937細(xì)胞Bcl-