轉(zhuǎn)基因16HBE細胞株的構(gòu)建及其在致癌活性檢測中的應(yīng)用.pdf

1、隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來越多的化學(xué)物質(zhì)進入人類生活。數(shù)量眾多的化學(xué)物質(zhì)在給人類生活帶來便利的同時也給人類健康帶來一定的威脅，其中尤為受人關(guān)注的是各種化學(xué)致癌物。為了保證化學(xué)物質(zhì)的安全使用，需要有一套敏感、高效而且特異的致癌活性檢測系統(tǒng)用于致癌物的篩查。目前應(yīng)用的包括短期試驗、哺乳動物長期誘癌試驗和人群流行病學(xué)調(diào)查在內(nèi)的三大類致癌活性檢測系統(tǒng)均有其不足之處，因此仍需要對致癌活性檢測系統(tǒng)加以完善。為了滿足日益增多的化學(xué)物致癌活性檢測需要，本

2、研究擬構(gòu)建處于惡性轉(zhuǎn)化前不同階段的非轉(zhuǎn)化細胞株并探討其用于致癌活性檢測的可行性。正常細胞向癌變細胞的轉(zhuǎn)化過程要經(jīng)歷細胞永生化、分化異常和惡性轉(zhuǎn)移等過程，在這個過程中有癌基因活化，抑癌基因失活等生物學(xué)事件的參與。本研究利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法在永生化的人支氣管上皮細胞16HBE的基礎(chǔ)上構(gòu)建癌基因H-Ras<'V12>(第12密碼子突變)和c-Myc高表達的轉(zhuǎn)基因細胞株(16HBER和16HBEM)。選擇已知的致癌物硫酸鎳染毒上