多靶向抗腫瘤轉(zhuǎn)移天然產(chǎn)物ECO-4601的全合成研究.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)腫瘤，通過(guò)各種方式轉(zhuǎn)移到其他組織或器官繼續(xù)生長(zhǎng)，形成與原發(fā)腫瘤相同性質(zhì)的繼發(fā)性腫瘤的過(guò)程。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的基本特征，是臨床腫瘤患者（90％以上）死亡的最主要原因。如何防止腫瘤轉(zhuǎn)移一直是腫瘤治療的最大難關(guān)。目前采用的大多數(shù)抗腫瘤藥物主要是抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和殺傷腫瘤細(xì)胞，這對(duì)增殖期的腫瘤細(xì)胞特別有效，而對(duì)許多處于休眠或蟄伏期的腫瘤細(xì)胞無(wú)效。因此，研制針對(duì)轉(zhuǎn)移過(guò)程和微小轉(zhuǎn)移灶的抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物，是提高惡性腫

2、瘤治愈率、降低治療后復(fù)發(fā)率和死亡率、延長(zhǎng)患者生命、提高患者的生活質(zhì)量的一個(gè)最主要的途徑。
　　 一般認(rèn)為，腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，牽涉到細(xì)胞脫落、浸潤(rùn)、遷移運(yùn)行、著床、新生血管生成等。從理論上講，只要能夠阻止上述一個(gè)或多個(gè)過(guò)程，就能抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。但是臨床應(yīng)用中作用靶點(diǎn)單一的抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物很難達(dá)到臨床應(yīng)用要求。因此，理想的抗腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移藥物應(yīng)是多靶向的，最好能作用于腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移過(guò)程的多個(gè)環(huán)節(jié)，同時(shí)對(duì)增殖期的腫瘤細(xì)胞也有

3、效。多靶向、多作用機(jī)制應(yīng)成為抗腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移藥物的研究新策略。
　　 ECO-4601（10-法尼墓-4,6,8-三羥基-5,10-二氫二苯并[b,e][1,4]二氮雜卓-11-酮）是從真放線菌株(046-ECO11)的二次代謝產(chǎn)物中分離得到的，其母核為獨(dú)特的二苯二氮雜卓酮結(jié)構(gòu)，在天然產(chǎn)物中非常罕見。ECO-4601具有廣譜抗腫瘤作用，對(duì)60余種腫瘤細(xì)胞系表現(xiàn)出高抑制活性(GI50在微摩爾級(jí))。ECO-4601可以選擇性作用于外

4、周苯二氮卓受體，干擾腫瘤Ras信號(hào)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖；ECO-4601對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9具有強(qiáng)抑制活性；ECO-4601還能明顯抑制腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移，抑制腫瘤新生血管生成等。因此，ECO-4601具有多靶向抗腫瘤和抗腫瘤轉(zhuǎn)移能力，目前已進(jìn)入Ⅲ期臨床研究。
　　 目前，ECO-4601只能從真放線菌的二次代謝產(chǎn)物中分離得到，尚未有ECO-4601的全合成研究報(bào)道，有關(guān)ECO-4601的構(gòu)效關(guān)系

5、也不明確。本研究的目的，就是通過(guò)建立ECO-4601的全合成方法，探討提供ECO-4601的有效化學(xué)途徑，并為進(jìn)一步合成ECO-4601衍生物，研究其抗腫瘤與抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性，明確該類化合物的構(gòu)效關(guān)系、尋找選高效低毒的抗腫瘤轉(zhuǎn)移ECO-4601衍生物奠定基礎(chǔ)。
　　 通過(guò)逆合成分析，我們以2,4-氯硝基苯為原料，經(jīng)甲氧基取代、還原、氨基保護(hù)、硝化、氨基脫保護(hù)、重氮化溴代反應(yīng)等，制備得到1,5-二甲氧基-3-硝基-2溴苯；以間甲氧基

6、苯甲酸為原料，經(jīng)硝化及硝基還原反應(yīng)，合成了2-氨基-3-甲氧基苯甲酸。通過(guò)探討1,5-甲氧基-3-硝基-2溴苯和2-氨基-3-甲氧基苯甲酸的偶聯(lián)反應(yīng)，建立了以銅催化的Ullmann偶合反應(yīng)合成二芳基取代胺的方法；通過(guò)對(duì)分子內(nèi)環(huán)合反應(yīng)以及酯的氨解反應(yīng)條件等進(jìn)行一系列探討，確立了以酯的氨解反應(yīng)，合成關(guān)鍵環(huán)狀中間體取代二苯二氮雜卓酮的方法；最終引入法尼基，合成了天然產(chǎn)物ECO-4601的酚羥基甲基化衍生物Me-ECO-4601。生物活性實(shí)驗(yàn)表

7、明，Me-ECO-4601的抗腫瘤血管生成和抗細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)活性優(yōu)于天然產(chǎn)物ECO-4601，而其細(xì)胞毒性較ECO-4601低，這表明通過(guò)對(duì)ECO-4601的結(jié)構(gòu)修飾，有望發(fā)現(xiàn)高效低毒的抗腫瘤轉(zhuǎn)移ECO-4601衍生物。
　　 總之，通過(guò)對(duì)ECO-4601的全合成研究，我們建立了合成關(guān)鍵環(huán)狀中間體取代二苯二氮雜卓酮的方法，合成了ECO-4601的甲基化衍生物Me-ECO-4601，研究了其抗腫瘤與抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性，為進(jìn)一步合成ECO