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1、目的:趨化因子是一種結(jié)構(gòu)上相似的小分子家族,它們?cè)诰S護(hù)免疫系統(tǒng)的自身穩(wěn)態(tài)平衡和功能方面扮演著非常重要的角色。ELR+CXC趨化因子,作為CXC趨化因子的一類,在中性粒細(xì)胞炎癥發(fā)生發(fā)展的過程中的起著非常重要的作用已經(jīng)被大家所承認(rèn),而我們的ELR+CXC趨化因子受體拮抗劑G31P可以高親和力結(jié)合其受體CXCR1/CXCR2,從而阻斷ELR+CXC趨化因子對(duì)中性粒細(xì)胞的趨化起到抗炎作用。綠膿桿菌(PA)在自然界中分布廣泛,可以分泌釋放多種毒性
2、成分,如內(nèi)毒素、外毒素a、彈性水解酶等,其感染是在院內(nèi)很常見。因此本文研究了G31P對(duì)小鼠綠膿桿菌肺炎模型的預(yù)防和治療作用。 方法:細(xì)菌準(zhǔn)備:測(cè)細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線來尋找細(xì)菌活性較強(qiáng)狀態(tài),用生理鹽水稀釋綠膿桿菌以備使用。G31P合成:人工合成人IL-8基因序列,然后采用定點(diǎn)突變的方法(K11R,G31P)對(duì)其進(jìn)行修改,緊接著使其與表達(dá)載體pGEX-2T相連,轉(zhuǎn)化大腸桿菌HB101,表達(dá)的蛋白通過Western Blotting進(jìn)行分析
3、鑒定。動(dòng)物處理:將107綠膿桿菌(PA 8821)在活性較強(qiáng)的狀態(tài)下以鼻孔內(nèi)注射途徑刺激小鼠肺炎,同時(shí)背部皮下注射G31P或生理鹽水作為實(shí)驗(yàn)組和陽(yáng)性對(duì)照組。檢測(cè)方法:通過肛測(cè)監(jiān)控經(jīng)過處理的小鼠體溫變化,18h后檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液(BALF)中自細(xì)胞及中性粒細(xì)胞數(shù)量變化,肺組織和支氣管肺泡灌洗液中髓過氧化物酶(MPO)分析,及組織病理學(xué)檢查。 結(jié)果:結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,G31P治療組的中性粒細(xì)胞比例有一定下降,髓過氧化物酶分泌
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