維胺酯及其代謝產(chǎn)物M-,1-、M-,2-體外活性研究.pdf

1、目的： 以全反式維甲酸(RA)為對照，研究維胺酯(VA)及其體內(nèi)代謝物M<,1>、M2的抗細胞增殖能力，并比較四種化合物對維甲酸類受體轉(zhuǎn)錄的激活能力，以探討它們在作用模式上與RA的異同性，為探討VA的作用機理以及開發(fā)新的維甲酸類藥物奠定基礎。 方法： 體外培養(yǎng)人宮頸癌上皮細胞HeLa細胞，采用XTT法檢測不同濃度的RA、VA、M<,1>、M<,2>對其增殖的影響。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將RARα、RARβ、RARγ

2、、RXRα受體質(zhì)粒，βRARE-tk-CAT、TREpal-tk-CAT報道質(zhì)粒和β-gal對照質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到HeLa細胞中，在1μM的RA、VA、M<,1>、M<,2>作用HeLa細胞24小時后用CAT ELISA法檢測CAT的相對表達量以研究四種化合物對受體轉(zhuǎn)錄的激活作用。 結果： 1．抗細胞增殖能力：1μM、5μM、10μM、50μM的RA、VA對HeLa細胞增殖的抑制作用與對照組相比沒有顯著性差異，在濃度為100μ

3、M時有抑制作用(P<0.01)，RA抑制率約為37％，VA抑制率約為83％，在濃度為500μM時細胞幾乎完全死亡；1μM、5μM、10gM的M<,1>、M<,2>對HeLa細胞增殖的抑制作用與對照組相比沒有顯著性差異，在濃度為50μM時有抑制作用(P<0.05，P<0.01)，M<,1>抑制率約為29％，M<,2>抑制率約為36％，在濃度為100μM時細胞幾乎完全死亡。 2．對受體轉(zhuǎn)錄的激活能力：RA對轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、R

4、ARγ受體質(zhì)粒的HeLa細胞引起的相對CAT表達量分別是對照組的117.7倍(p<0.01)、53.8倍(p<0.01)、44.3倍(p<0.01)；VA對轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、RARγ受體質(zhì)粒的HeLa細胞引起的CAT的相對表達量分別是對照組的2.1倍(p<0.05)、2.1倍、1.4倍(p<0.05)；RA、VA對轉(zhuǎn)染RXRα受體質(zhì)粒的HeLa細胞均不引起相對CAT表達量的升高；M<,1>、M<,2>對轉(zhuǎn)染四種受體質(zhì)粒的HeLa細

5、胞均不引起相對CAT表達量的升高。 結論： 抗細胞增殖試驗結果表明，上述四種化合物對HeLa細胞的抗增殖能力大小的比較順序為M<,2>>M<,1>>VA>RA。說明VA在體內(nèi)的抗細胞增殖能力，除了VA原藥本身的作用外，其體內(nèi)代謝產(chǎn)物M<,1>、M<,2>也參與了這一過程，而且活性比原藥更強。 在受體水平上，相對于RA而言，VA對RARα、RARβ、RARγ有微弱的激活作用，而M<,1>、M<,2>對RARα、RA