開(kāi)放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng)下壓力對(duì)人眼小梁細(xì)胞自分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β-,2-的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、[目的]采用自行設(shè)計(jì)組裝的新型細(xì)胞培養(yǎng)加壓實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀_(kāi)放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng),研究壓力作用水平及作用時(shí)間對(duì)體外培養(yǎng)的人眼小梁細(xì)胞自分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2(transforminggrowthfactor—beta2,TGF-β2)的影響,并且探討TGF-β2在原發(fā)開(kāi)角型青光眼發(fā)病機(jī)制中的影響。 [方法]采用組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人眼小梁細(xì)胞,傳代至第5代用于本實(shí)驗(yàn)。根據(jù)動(dòng)態(tài)循環(huán)氣體控制壓力的原理對(duì)細(xì)胞加壓,對(duì)照組細(xì)胞不施加壓力(0

2、mmHg),實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞分別施加20、40、60和80mmHg壓力,各組細(xì)胞在不同壓力水平下分別于開(kāi)放式壓力控制系統(tǒng)中持續(xù)培養(yǎng)0、12、24、36h。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)法測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中TGF-β2濃度。 [結(jié)果]實(shí)驗(yàn)組小梁細(xì)胞自分泌TGF-β2水平隨壓力增高而增高,與對(duì)照組比較,差異有顯著性意義(P<0.05);在20~60mmHg壓

3、力范圍內(nèi),加壓培養(yǎng)持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng),TGF-β2水平升高越明顯(P<0.05),其中40mmHg壓力水平下培養(yǎng)36h組的小梁細(xì)胞分泌TGF-β2水平最高(1305.36±105.33pg·ml-1);雖然在80mmHg壓力水平下,TGF-β2水平升高幅度下降,但加壓培養(yǎng)12和24h組細(xì)胞分泌的TGF-β2水平仍明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。 [結(jié)論]在開(kāi)放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng)中,隨著壓力水平的增高,在細(xì)胞可耐受范圍內(nèi),小梁細(xì)胞自分泌

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