白介素37對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)的大鼠肝星狀細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:觀察重組人白細(xì)胞介素37(Interleukin37，IL-37)對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（Transform Growth Factor-beta1，TGF-β1）誘導(dǎo)的活化大鼠肝星狀細(xì)胞(rat hepatic stellate cell，HSC-T6)的增殖效應(yīng)的影響，并觀察其對(duì)HSC-T6表達(dá)的纖溶酶原激活抑制物1(PlasminogenActivator Inhibitor1，PAI-1)和平滑肌肌動(dòng)蛋白α(Smooth Mu

2、scle Actinα，SMA-α)表達(dá)的影響。初步探討IL-37可能的抗肝纖維化作用及其機(jī)制。
　　方法:1.不同細(xì)胞因子濃度培養(yǎng)基制備及實(shí)驗(yàn)分組:以改良杜氏伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified EagleMedium，DMEM)為基礎(chǔ)液配制，實(shí)驗(yàn)共分為5組，即空白對(duì)照組:僅含DMEM培養(yǎng)基;實(shí)驗(yàn)組A:含TGF-β1(5ng/ml)，不含有重組IL-37b;實(shí)驗(yàn)組B、實(shí)驗(yàn)組C及實(shí)驗(yàn)組D含有與A組相同濃度的TGF-

3、β1，且含有濃度梯度逐漸升高的重組人IL-37b(10ng/ml，100ng/ml，200ng/ml)。2.檢測(cè)HSC-T6增殖及目標(biāo)蛋白表達(dá):在各組不同細(xì)胞因子濃度作用下HSC-T6培養(yǎng)12h、24h、48h后，用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)檢測(cè)HSC增殖情況;細(xì)胞爬片后，繼續(xù)藥物作用24小時(shí)，用免疫組化法檢測(cè)不同組培養(yǎng)基作用后SMA-α、PAI-1表達(dá)情況。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:檢測(cè)相同時(shí)間下，不同藥物濃度細(xì)胞增殖情況及SMA-α、P

4、AI-1表達(dá)情況，采用單因素方差分析;B組、C組及D組間比較細(xì)胞增殖抑制率，采用兩因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果:1.對(duì)HSC-T6增殖抑制作用:在重組人IL-37b與TGF-β1共培養(yǎng)12h、24h、48h后，B組、C組、D組HSC-T6吸光度均低于A組，P值均小于0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明不同濃度重組人IL-37b在12h、24h、48h均有對(duì)活化的大

5、鼠肝星狀細(xì)胞增殖的抑制作用。在不同時(shí)間點(diǎn)的組內(nèi)比較提示，在24h各組抑制作用明顯，且不同濃度的抑制率不同，為濃度越高，抑制率越明顯，P值＜0.001，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;在12h不同藥物濃度組抑制率均低，且各組間抑制率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在48h不同藥物組的抑制率均較高，且各組間抑制率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值＞0.05，無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.IL-37對(duì)活化的HSC-T6表達(dá)SMA-α的影響:在IL-37b干預(yù)組的B組、C組、D組SMA-α表達(dá)

6、量可較無(wú)IL-37b的A組干預(yù)組明顯減少，且存在有劑量效應(yīng)關(guān)系，IL-37b濃度越高對(duì)SMA-α表達(dá)抑制作用越明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3.IL-37對(duì)活化的HSC-T6表達(dá)PAI-1的影響:在IL-37b干預(yù)組的B組、C組、D組PAI-1表達(dá)量可較無(wú)IL-37b的A組干預(yù)組明顯減少，且存在有劑量效應(yīng)關(guān)系，IL-37b濃度越高對(duì)PAI-1表達(dá)抑制作用越明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.重組人IL-37b