葡萄糖、AGEs對(duì)ECV304細(xì)胞COX-2mRNA的表達(dá)影響及辛伐他汀、NS398的干預(yù)作用.pdf

1、目的：探討葡萄糖及糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)COX-2mRNA的影響；辛伐他汀、選擇性COX-2抑制劑NS398對(duì)葡萄糖、AGEs誘導(dǎo)的ECV304細(xì)胞COX-2mRNA的干預(yù)作用。 方法：體外培養(yǎng)ECV304，待細(xì)胞呈對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，2-3次/周換液。 1.MTT法檢測(cè)不同濃度葡萄糖、AGE-BSA作用ECV304同一時(shí)間對(duì)細(xì)胞增殖影響和同一濃度葡萄糖、AGE-BSA作用不同時(shí)間時(shí)對(duì)細(xì)胞增

2、殖的影響； 2.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)葡萄糖、AGE-BSA在不同實(shí)驗(yàn)條件下作用ECV304細(xì)胞對(duì)COX-2 mRNA表達(dá)影響及NS398、辛伐他汀對(duì)該表達(dá)的干預(yù)作用： 3.收集上述各干預(yù)組的細(xì)胞培養(yǎng)上清液，放免法檢測(cè)前列腺素代謝產(chǎn)物PGE<,2>濃度。 結(jié)果： 1.葡萄糖及AGE-BSA抑制ECV304細(xì)胞增殖，且有濃度、時(shí)間依賴效應(yīng)； 2.COX-2mRNA的表達(dá)水平和PGE

3、<,2>的濃度隨著葡萄糖、AGE-BSA濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)而增加(P<0.05)； 3.擇性COX-2抑制劑NS398、辛伐他汀分別于葡萄糖、AGE-BSA共同干預(yù)ECV304，可部分或完全抑制COX-2mRNA的表達(dá)和PGE<,2>的合成(P<0.05)。 結(jié)論： 1.葡萄糖及AGE-BSA呈濃度、時(shí)間依賴方式抑制ECV304細(xì)胞增殖，提示高糖、AGEs引起的細(xì)胞增殖抑制作用參與糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展

4、； 2.葡萄糖、AGE-BSA呈濃度、時(shí)間依賴方式上調(diào)ECV304細(xì)胞COX-2的表達(dá)和PGE<,2>的合成，提示高糖及AGEs可損傷內(nèi)皮細(xì)胞、介導(dǎo)COX-2/PGE<,2>表達(dá)、擴(kuò)大炎癥反應(yīng)，參與糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)展； 3.選擇性COX-2抑制劑NS398能逆轉(zhuǎn)葡萄糖、AGE-BSA誘導(dǎo)的ECV304細(xì)胞COX-2表達(dá)上調(diào)及PGE<,2>的水平增加，揭示COX-2可能成為抗炎治療的靶因子，為糖尿病血管并發(fā)癥的防治提供