2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、該文進(jìn)行小鼠內(nèi)皮抑素基因的克隆及表達(dá),基因工程方法構(gòu)建了鼠內(nèi)皮抑素的溫敏型表達(dá)載體pBV220-endostatin,為此作了以下工作:1.從小鼠肝臟細(xì)胞中提取總RNA.設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異引物,分別帶有EcoRI和BamHI的限制性內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn).用RT-PCR法擴(kuò)增endostatin的基因片段,在endostatin基因的兩側(cè)引入EcoRI和BamHI酶切位點(diǎn).2.用EcoRI和BamHI酶切endostatin cDNA的PCR產(chǎn)

2、物,將其插入到質(zhì)粒載體pBV220中相應(yīng)的限制性酶切位點(diǎn),構(gòu)建非融合質(zhì)粒表達(dá)載體pBV220-endostatin.3.將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到克隆菌DH5a中,經(jīng)PCR篩選和限制性內(nèi)切酶鑒定,得到陽(yáng)性克隆菌株.4.以雙脫氧末端終止法對(duì)重組質(zhì)粒pBV220-endostatin進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果表明與已知小鼠endostatin基因序列一致.5.溫度誘導(dǎo)重組質(zhì)粒pBV220-endostatin在宿主菌中表達(dá)外源蛋白.6.用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)表

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