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1、乳腺癌是當(dāng)今世界女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,嚴(yán)重危害婦女身心健康<'[1]>.乳腺癌生長(zhǎng)侵襲依賴于血管新生,血管新生依賴于內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖,而內(nèi)皮細(xì)胞則是通過整合素等分子粘附到細(xì)胞外基質(zhì)得以遷移的.圍繞著粘附蛋白整合素αvβ3,本研究分以下兩個(gè)方面進(jìn)行:一、乳腺癌細(xì)胞對(duì)正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞整合素αvβ3表達(dá)的影響及抗αvβ3人鼠嵌合抗體表達(dá)載體的構(gòu)建方法:將乳腺癌腫瘤細(xì)胞系MDA-MB-231與正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng),免疫磁珠法分
2、選其中的內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)行透射電鏡觀察,然后提取正常內(nèi)皮細(xì)胞及共培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞的總RNA進(jìn)行RT-PCR,觀察兩組內(nèi)皮細(xì)胞該基因表達(dá)的差異.另外嘗試克隆了鼠抗αvβ3單克隆抗體的輕重鏈可變區(qū)基因,測(cè)序后與人恒定區(qū)連接并插入表達(dá)載體pEFdhfr1a,酶切鑒定.結(jié)論:乳腺癌細(xì)胞促進(jìn)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞整合素αvβ3的表達(dá).構(gòu)建了抗αVβ3嵌合抗體的輕重鏈表達(dá)載體pEFdhfr1αL和pEFdhfr1aH.二、光學(xué)蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)阿侖磷酸鈉作用后乳腺
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