大鼠嚴重創(chuàng)傷早期神經(jīng)元、心肌和骨骼肌細胞缺血缺氧性損害的差異性研究.pdf

1、該課題擬以大鼠30﹪TBSA Ⅲ度燒傷為嚴重創(chuàng)傷動物模型,以對缺血缺氧反應敏感性不同的大腦皮質(zhì)(皮質(zhì)神經(jīng)元)、左室肌(心肌細胞)、腓腸肌(骨骼肌細胞)為研究對象,應用組織化學、免疫組化,細胞培養(yǎng)及新興的基因芯片和抑制消減雜交等方法和技術,從細胞、亞細胞、蛋白和基因等水平探討上述組織、細胞嚴重創(chuàng)傷早期缺血缺氧性損害的差異性.主要結果和結論如下:1.大鼠30﹪TBSAⅢ°燒傷后以大腦皮質(zhì)病變出現(xiàn)最早、程度最重、持續(xù)時間最長,心室肌組織次之,

2、骨骼肌病變較輕.2.嚴重燒傷后大腦皮質(zhì)、心室肌和骨骼肌組織琥珀酸脫氫酶、乳酸脫氫酶活性依次降低(LDH活性先升高后降低),降低幅度由大到小.提示有氧代謝和無氧酵解途徑的差異是嚴重燒傷后不同組織細胞缺血缺氧性損害敏感性不同的原因之一.3.嚴重燒傷后大腦皮質(zhì)、心室肌和骨骼肌組織之間的一氧化氮、黃嘌吟氧化酶、髓過氧化物酶、丙二醛等的含量和/或活性出現(xiàn)升高,其升高出現(xiàn)時間的早晚、升高幅度及持續(xù)時間存在顯著不同.表明這些因素在決定不同組織細胞缺血

3、缺氧性損害程度方面發(fā)揮著重要作用.4. 嚴重燒傷后四種即早基因編碼蛋白iNOS、c-fos、bcl-2、HSP70在三種組織內(nèi)的表達時間、細胞定位、分布及表達強弱均存在差異,從而在蛋白表達水平為探討不同組織細胞缺血缺氧性損害的差異性機制提供了實驗依據(jù).5.應用4096點的基因芯片,以嚴重缺氧6h的骨骼肌細胞為對照,分別檢測了同樣程度缺氧后的心肌細胞和神經(jīng)元差異表達基因,分析結果顯示,神經(jīng)元有30個基因高表達,101個基因在心肌細胞高表達