粘膜免疫相關(guān)基因的克隆與功能研究.pdf

1、該課題包括對粘膜免疫相關(guān)新基因TIG-310和粘膜抗原提呈分子小鼠CD1d的研究.該實驗室在分析研究Ty21a免疫小鼠前后腸粘膜差異表達的基因時,發(fā)現(xiàn)了數(shù)條在Ty21a免疫后表達量發(fā)生改變的新表達序列標簽(Expression Sequence Tag,ESTs),為了深入研究相應(yīng)新基因的粘膜免疫中的作用,我們采用了RACE-PCR技術(shù)以擴增這些ESTs所對應(yīng)的基因全長.其中擴增得到了EST310的全長基因(TIG-310).為了研究T

2、IG-310是否與粘膜免疫相關(guān),我們利用pQE30原核表達系統(tǒng),獲得TIG-310基因在M15受體菌株中的高效表達.利用RT-PCR技術(shù)分析了該基因在正常Balb/c小鼠腦、心臟、胸腺、肺、胃、腎、腸、肝、脾、PP結(jié)、MLN、子宮等12種組織的表達情況,發(fā)現(xiàn)該基因高表達于胃腸粘膜部位,在PP結(jié)上有較弱表達.為觀察CD1分子是否對不同來源的淋巴細胞具有刺激活性,將表達mCD1d的CHO細胞分別與從脾、肝、胸腺、PP和MLN等不同部位新分離