大鼠前庭毛細(xì)胞神經(jīng)遞質(zhì)受體分布及功能.pdf

1、第一部分 單細(xì)胞RT-PCR方法的建立及煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基在大鼠單個(gè)Ⅱ型前庭毛細(xì)胞中的表達(dá) 目的：乙酰膽堿(Ach)是脊椎動(dòng)物外周前庭系統(tǒng)最主要的傳出神經(jīng)遞質(zhì)，并且煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基(nAChR)被認(rèn)為是介導(dǎo)外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號(hào)的主要受體之一。研究表明人類與其他哺乳類動(dòng)物(包括大鼠)的乙酰膽堿能傳出神經(jīng)纖維支配模式相近，而人類與鳥類之間乙酰膽堿能傳出神經(jīng)纖維支配模式間有許多差別。因此以大鼠為研究對(duì)

2、象可以幫助了解人類單個(gè)前庭毛細(xì)胞的神經(jīng)纖維支配模式及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式，進(jìn)而為前庭疾病的病理機(jī)制闡明及前庭疾病的治療提供理論基礎(chǔ)。本研究目的為建立單細(xì)胞RT-PCR方法及檢測(cè)α9nAChR在大鼠單個(gè)Ⅱ型前庭毛細(xì)胞中的表達(dá)。 方法：用RT-PCR方法檢測(cè)α9nAChR在大鼠前庭終器中的表達(dá)；建立單細(xì)胞RT-PCR方法并用單細(xì)胞RT-PCR方法檢測(cè)α9nAChR在大鼠單個(gè)Ⅱ型前庭毛細(xì)胞中的表達(dá)。 結(jié)論：此研究成功地建立了單細(xì)胞RT

3、-PCR方法，其可以有效地檢測(cè)在單個(gè)前庭毛細(xì)胞中某種mRNA特異性的表達(dá)。研究結(jié)果證實(shí)α9nAChR在大鼠單個(gè)Ⅱ型前庭毛細(xì)胞中有表達(dá)，并進(jìn)一步表明α9nAChR是介導(dǎo)外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號(hào)的主要受體之一。 第二部分 γ-氨基丁酸B型受體GB1亞基在大鼠前庭終器的表達(dá) 目的：檢測(cè)大鼠前庭終器中γ-氨基丁酸B型受體(GABAB受體)GB1亞基的表達(dá)，探討GABAB受體在大鼠前庭終器的分布。 方法：根據(jù)G

4、eneBank公布的大鼠GABAB受體GB1亞基的mRNA序列設(shè)計(jì)跨內(nèi)含子的特異性引物，運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)大鼠前庭終器中編碼GABAB受體GB1亞基的mRNA的表達(dá)，對(duì)PCR產(chǎn)物測(cè)序確認(rèn)。 結(jié)論：在大鼠前庭終器組織中有GABAB受體GB1亞基的表達(dá)。提示GABAB受體可能介導(dǎo)前庭外周系統(tǒng)GABA能信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)。 第三部分 GABAB受體在大鼠單個(gè)Ⅰ型前庭毛細(xì)胞中的表達(dá)及功能 目的：GABA是大鼠外周前

5、庭系統(tǒng)的傳出神經(jīng)遞質(zhì)之一。通常認(rèn)為哺乳類動(dòng)物Ⅰ型前庭毛細(xì)胞(VHCsⅠ)為傳入神經(jīng)盞完全包裹而沒有傳出神經(jīng)末梢直接支配。但1991年Wackymetal.報(bào)道CGRP免疫陽(yáng)性傳出神經(jīng)末稍偶爾會(huì)穿過包繞大鼠VHCsⅠ的傳入神經(jīng)盞與某些大鼠VHCsⅠ直接接觸。目前尚無(wú)關(guān)于GABA能傳出神經(jīng)末稍是否直接支配大鼠VHCsⅠ的研究。本研究目的為探討GABAB受體在大鼠VHCsI中表達(dá)及其電生理特性，提出并證明GABA能傳出神經(jīng)末稍可能直接支配某些