鉑類抗腫瘤藥體外腎毒性的比較研究.pdf

1、該研究首先對(duì)永生化的人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)用于體外藥物腎毒性研究的可能性進(jìn)行了評(píng)價(jià),選擇臨床上常用的具有明顯腎毒性的藥物(順鉑、環(huán)孢素A和兩性霉素B)以及臨床已經(jīng)證實(shí)沒(méi)有腎毒性的藥物(阿司匹林、阿莫西林和環(huán)磷酰胺),檢測(cè)上述藥物對(duì)HK-2細(xì)胞的毒作用與臨床是否一致.結(jié)果發(fā)現(xiàn)臨床上腎毒性比較明顯的藥物,在10~50μmol/L劑量就能夠?qū)K-2細(xì)胞產(chǎn)生明顯的細(xì)胞毒性作用,臨床上沒(méi)有腎毒性的藥物在高出約100倍的劑量下才可能產(chǎn)生相同

2、效應(yīng),例如順鉑引起HK-2細(xì)胞周期明顯改變以及LDH漏出增加的劑量是5μmol/L,環(huán)孢素A和兩性霉素B發(fā)生相同效應(yīng)是25~50μmol/L,而阿司匹林、阿莫西林和環(huán)磷酰胺即使在1000μmol/L也未引起HK-2細(xì)胞上述指標(biāo)的顯著性改變.因此,利用HK-2細(xì)胞作為模型對(duì)鉑類抗腫瘤藥進(jìn)行體外腎毒性的比較研究是可行的.其次我們以MTT和LDH漏出檢測(cè)三代鉑類抗腫瘤藥物的細(xì)胞毒性,流式細(xì)胞儀PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期以及Annexin-V/PI雙

3、染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Western蛋白印跡檢測(cè)熱休克蛋白(HSP70)和免疫熒光法檢測(cè)金屬硫蛋白(MT)的表達(dá),從細(xì)胞和分子水平對(duì)三代鉑類抗腫瘤藥的腎毒性進(jìn)行比較研究;同時(shí)也對(duì)三代鉑類抗腫瘤藥的體內(nèi)腎毒性進(jìn)行了比較,觀察SD大鼠重復(fù)靜脈注射三代鉑類抗腫瘤藥后腎毒性相關(guān)的血液學(xué)、血液和尿液生化指標(biāo)及組織病理學(xué)的改變,驗(yàn)證體外腎毒性與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)是否一致.該研究利用HK-2細(xì)胞對(duì)順鉑、卡鉑和雙環(huán)鉑三代鉑類抗腫瘤藥的體外腎毒性進(jìn)行了比較研究,并初步

4、探討了鉑類抗腫瘤藥對(duì)HK-2細(xì)胞腎毒性可能的機(jī)理.得出以下主要結(jié)論:1.HK-2細(xì)胞對(duì)腎毒性藥物比較敏感,能夠在體外反映藥物腎毒性的大小,利用該細(xì)胞建立的體外模型來(lái)篩選和評(píng)價(jià)藥物腎毒性是可行的.2.順鉑對(duì)HK-2細(xì)胞的毒性明顯大于卡鉑和雙環(huán)鉑,而卡鉑和雙環(huán)鉑對(duì)HK-2細(xì)胞的毒性相近.3.三代鉑類抗腫瘤藥體內(nèi)腎毒性大小比較的結(jié)果與體外對(duì)HK-2細(xì)胞的毒性結(jié)果基本一致,腎毒性將不會(huì)成為限制雙環(huán)鉑臨床應(yīng)用的主要毒副作用.4.順鉑誘導(dǎo)HK-2凋