丹參酮ⅡA對骨髓間充質干細胞在心梗大鼠體內定向募集的影響及機制研究.pdf

1、研究TanIIA對BMSCs向梗死心肌募集的影響及機制，為中藥干預干細胞的研究提供一些新的思路。
　　 實驗一：骨髓間充質干細胞在心肌梗死大鼠體內定向募集的研究
　　 實驗目的：觀察靜脈移植BMSCs在心梗大鼠體內的定向募集及分化情況。
　　 實驗方法：采用結扎雌性大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)的方法建立急性心肌梗死模型(MI)。MI3小時后靜脈移植5×106/0.5ml Dil標記的BMSCs，1周或4周后取心

2、臟等臟器進行冰凍切片。熒光顯微鏡觀察BMSCs移植1周后在各臟器中的分布情況；免疫熒光染色觀察BMSCs移植4周后在心臟受損部位的分化情況。
　　 實驗結果：心梗大鼠靜脈移植BMSCs后1周，可在心梗大鼠的心臟受損部位及其他特定器官如(肺、肝臟、脾臟、骨髓)中觀察到BMSCs；心梗大鼠靜脈移植BMSCs后4周，可在心梗部位發(fā)現少量BMSCs表達心肌特異性標記(Connexin43和Troponin1)，但BMSCs仍保留干細胞形

3、態(tài)。
　　 實驗二：丹參酮ⅡA對BMSCs在心梗大鼠體內定向募集的影響及機制研究
　　 實驗目的：以SDF-1/CXCR4軸為切入點，研究Tan II A對BMSCs向梗死心肌募集的影響及機制。
　　 實驗方法：整體實驗分為5組：①假手術組；②模型組；③TanⅡA治療組；④BMSCs移植治療組；⑤TanⅡA合并BMSCs移植治療組。治療1周或4周后，記錄大鼠血流動力學指標；以Real-time PCR相對定量募集

4、至心梗部位BMSCs數量；ELISA測定心梗大鼠血清及左心室壁SDF-1α蛋白的含量；Masson三色染色檢測心肌梗死程度及血管新生情況；免疫組化檢測VEGF的表達；體外遷移實驗考察TanⅡA對于BMSCs體外遷移能力的影響；細胞免疫熒光法檢測BMSCs表面CXCR4表達情況。
　　 實驗結果：TanIIA能夠顯著增加BMSCs向心梗心臟的募集，并相應的提高心功能，減小梗死面積，提高VEGF的表達，促進血管新生。TanIIA能夠

5、適當促進心梗組織分泌SDF-1α，增強SDF-1α及HIF-1αmRNA的表達，提高血循環(huán)中SDF-1α的濃度。同時，它能夠增強體外培養(yǎng)BMSCs的CXCR4表達。體外遷移實驗同樣證明，TanIIA能夠顯著提高BMSCs的遷移能力，并且這種促遷移能力可被CXCR4的拮抗劑AMD3100消除。結果說明，TanIIA是通過調控SDF1/CXCR4軸以促進BMSCs向心梗部位的募集。
　　 實驗結論
　　 1、靜脈移植的BMS