小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道轉移株蛋白質分子的差異表達.pdf

1、本實驗采用載體兩性電解質雙向凝膠電泳(2-DE)技術，通過分離小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道轉移株細胞的總蛋白，并比較兩者的蛋白質表達譜，展示兩者差異，以發(fā)現(xiàn)與肝癌淋巴道轉移相關的蛋白質分子，為進一步研究肝癌淋巴道轉移機制奠定基礎。 研究方法：分別采用超聲破碎和化學裂解方法提取小鼠腹水型肝癌淋巴道高轉移株(Hca-F)和低轉移株(Hca-P)的總蛋白，比色法測定蛋白質濃度，載體兩性電解質雙向凝膠電泳分離Hca-F和Hca-P的總蛋白

2、，凝膠經考馬斯亮藍顯色后，PDQuest8.0圖像分析軟件進行比對分析，識別差異表達的蛋白質。 研究結果： 1.蛋白質濃度運用超聲破碎法處理細胞測得Hca-F總蛋白濃度為8.54μg/μl，Hca-P為8.53μg/μl。 運用化學裂解法處理細胞測得Hca-F總蛋白濃度為5.49μg/μl，Hca-P為6.71μg/μl。 2.2-DE圖譜特征在Hca-F細胞凝膠圖譜上可識別252個蛋白點，在Hca-P細

3、胞凝膠圖譜上可識別365個蛋白點，兩者共有213個點相匹配，這些蛋白質分布于PI4～6，分子量在12kD～29kD之間。共檢測到9個蛋白點(PI4.01，MW15.66；PI4.00，MW25.00；PI4.09，MW15.80；PI4.12，MW14.80；PI4.14，MW22.12；PI5.38，MW21.81；PI5.41，MW21.85；PI5.45，MW21.98；PI5.69，MW14.03)在Hca-P細胞中表達量很高，

4、但在Hca-F細胞中未出現(xiàn)；未檢測到在Hca-F中表達量很高但在Hca-P中未出現(xiàn)的點。Hca-P細胞蛋白表達量是Hca-F10倍以上的蛋白點有11個(P14.02,MW15.86；PI4.11，MW15.80；PI4.71，MW19.66；PI4.88，MW13.71；PI4.85，MW26.35；PI4.78，MW28.93；PI4.97，MW28.62；PI5.08，MW12.92；PI5.45，MW21.98；PI5.49，MW

5、22.04；PI5.69，MW14.86)；Hca-F細胞蛋白表達量是Hca-P10倍以上的蛋白點有2個(PI5.22,MW19.83；PI5.37,MW19.48)。Hca-P細胞蛋白表達量是Hca-F5～10倍的蛋白點有14個；Hca-F細胞蛋白表達量是Hca-P5～10倍的蛋白點有3個。Hca-P細胞蛋白表達量是Hca-F2～5倍的蛋白點有26個；Hca-F細胞蛋白表達量是Hca-P2～5倍的蛋白點有19個。 研究結論：雙