脂肪細(xì)胞培養(yǎng)上清增加肝細(xì)胞糖原合成的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討分化的3T3L1脂肪細(xì)胞培養(yǎng)上清及未分化的3T3L1前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)肝細(xì)胞胰島素信號(hào)通路、糖原合成的影響及其作用機(jī)制。 方法：誘導(dǎo)3T3L1細(xì)胞分化成為脂肪細(xì)胞，收取分化及未分化的3T3L1細(xì)胞培養(yǎng)上清；用該上清分別培養(yǎng)小鼠原代肝細(xì)胞和HepG2細(xì)胞24小時(shí)，利用糖原染色方法(PAS染色)檢測肝細(xì)胞的糖原合成功能；通過Western blot檢測上述細(xì)胞胰島素信號(hào)通路分子磷酸化水平的改變，選取磷酸化的IRS-2和A

2、kt作為檢測指標(biāo)；通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞在上清培養(yǎng)后的周期變化；觀察上清培養(yǎng)0-2小時(shí)對(duì)細(xì)胞Akt磷酸化水平的影響及加入炎癥因子TNF-α后Akt磷酸化水平的改變。 結(jié)論：脂肪細(xì)胞及前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)上清能夠促進(jìn)肝細(xì)胞合成糖原，上調(diào)肝細(xì)胞IRS-2(Tyr612)、Akt(Ser473)的磷酸化水平。脂肪細(xì)胞及前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)上清培養(yǎng)30分鐘明顯上調(diào)Akt(Ser473)磷酸化水平，該作用可以被TNF-α所中和。這一結(jié)果提示在未受