心梗后大鼠心肌TNF-α表達(dá)與室性心律失常系關(guān)的究研.pdf

1、第一部分TNF-α在心梗后大鼠心肌細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用
　　目的:研究TNF-α在心梗后大鼠心室肌細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用。
　　方法:將360只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組,n=120)、TNF-α螯合劑組(rhTNFR:Fc組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)3組,運(yùn)用LAD結(jié)扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d、14d

2、、1m、2m后,分別運(yùn)用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)室性心律失常。同時(shí)用激光共聚焦顯微鏡觀察TNF-α蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測(cè)心室肌TNF-α蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:與假手術(shù)組相比,各時(shí)間點(diǎn)心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測(cè)的心室肌組織TNF-α表達(dá)明顯增加(P<0.05),且隨著心梗的病理進(jìn)程TNF-α的表達(dá)逐漸增加,在14d達(dá)到峰值后逐漸降

3、低;與心梗組相比,各時(shí)間點(diǎn)rhTNFR:Fc組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯降低(P<0.05),WesternBlot檢測(cè)的心肌組織TNF-α表達(dá)顯著減少(P<0.05)。
　　結(jié)論:與假手術(shù)組相比,心梗后大鼠心肌組織TNF-α表達(dá)明顯增加,且隨心梗的病理進(jìn)程其表達(dá)增加,在14d達(dá)到峰值后逐漸降低;減少TNF-α的表達(dá)可以降低心梗后室性心律失常的發(fā)生率;大量TNF-α表達(dá)在心梗后室性心律失常的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用。

4、r>　　第二部分Cx43在心梗后大鼠心肌細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用
　　目的:研究Cx43在心梗后大鼠心室肌細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用。
　　方法:將240只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)2組,運(yùn)用LAD結(jié)扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d、14d、1m、2m后,分別運(yùn)用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)

5、室性心律失常。同時(shí)用激光共聚焦顯微鏡觀察Cx43蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測(cè)心室肌非磷酸化Cx43和磷酸化Cx43蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:與假手術(shù)組相比,各時(shí)間點(diǎn)心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測(cè)的心室肌組織非磷酸化Cx43表達(dá)顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達(dá)顯著降低(P<0.05),且隨著心梗的病理進(jìn)程Cx43的表達(dá)逐漸變化,在14d

6、變化最顯著并在其后穩(wěn)定存在。激光共聚焦顯微鏡觀察顯示,假手術(shù)組Cx43在心室肌細(xì)胞上分布較有序,主要分布在閏盤(pán)處;心梗組Cx43在心室肌細(xì)胞上分布紊亂,主要在心室肌細(xì)胞間側(cè)對(duì)側(cè)分布;此種異常分布也在心梗后14d最為顯著。
　　結(jié)論:心梗后大鼠心室肌組織Cx43出現(xiàn)非磷酸化重構(gòu),在心室肌細(xì)胞上的分布出現(xiàn)異常,且隨心梗的病理進(jìn)程其表達(dá)增加,在14d達(dá)到峰值,并在其后穩(wěn)定存在;Cx43的表達(dá)和分布異常與心梗后室性心律失常的發(fā)生密切相關(guān)。

7、
　　第三部分大鼠心肌梗死后TNF-α對(duì)Cx43的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)室性心律失常發(fā)生的影響
　　目的:研究TNF-α對(duì)大鼠心肌梗死后Cx43的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)心肌梗死后室性心律失常發(fā)生的影響。
　　方法:將360只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組,n=120)、TNF-α螯合劑組(rhTNFR:Fc組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)3組,運(yùn)用LAD結(jié)扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d

8、、14d、1m、2m后,分別運(yùn)用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)室性心律失常。同時(shí)用激光共聚焦顯微鏡觀察TNF-α和Cx43蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測(cè)心室肌TNF-α、非磷酸化Cx43以及磷酸化Cx43蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:與假手術(shù)組相比,各時(shí)間點(diǎn)心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測(cè)的心室肌組織TNF-α表達(dá)明顯增加(P<0.05),非磷酸化Cx43

9、表達(dá)顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達(dá)顯著降低(P<0.05)且隨著心梗的病理進(jìn)程TNF-α、非磷酸化Cx43、磷酸化Cx43的表達(dá)逐漸變化,在14d達(dá)到峰值后TNF-α的表達(dá)逐漸降低,而非磷酸化Cx43、磷酸化Cx43的表達(dá)在其后穩(wěn)定存在;激光共聚焦顯微鏡觀察顯示,假手術(shù)組Cx43在心室肌細(xì)胞上分布較有序,主要分布在閏盤(pán)處;心梗組Cx43在心室肌細(xì)胞上分布紊亂,主要在心室肌細(xì)胞間側(cè)對(duì)側(cè)分布;此種異常分布也在心梗后14d最為顯

10、著。與心梗組相比,各時(shí)間點(diǎn)rhTNFR:Fc組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯降低(P<0.05),WesternBlot檢測(cè)的心室肌組織TNF-α表達(dá)顯著減少(P<0.05),非磷酸化Cx43表達(dá)顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達(dá)顯著降低(P<0.05);激光共聚焦顯微鏡觀察顯示Cx43的分布紊亂有改善,在心室肌細(xì)胞間主要呈端對(duì)端分布。
　　結(jié)論:心梗后,心室肌細(xì)胞中高表達(dá)的TNF-α可以誘導(dǎo)Cx43非磷酸化重