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文檔簡介
1、目的:探討β-Catenin酪氨酸磷酸化對Ki-67轉錄調控的影響。
方法:用Western Blot檢測細胞中β-Catenin的表達及genistein作用后細胞核中β-Catenin表達及genistein作用后細胞中酪氨酸磷酸化的β-Catenin的水平;用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測genistein作用后、轉入β-Catenin小干擾后及其轉入β-Catenin質粒后,Ki-67基因啟動子轉錄活性的變化;用免疫細胞化學檢
2、測genistein作用后細胞中Ki-67的表達水平;用Annexin V-PI檢測genistein作用后對細胞凋亡的影響。
結果:β-Catenin在正常細胞中的表達水平比在腫瘤細胞中的表達高;而腫瘤細胞細胞核中β-Catenin的表達水平比腫瘤細胞細胞漿中β-Catenin的表達水平高,正常細胞細胞漿中β-Catenin的表達水平比正常細胞細胞核中β-Catenin的表達水平高;genistein作用后Ki-67核心啟動
3、子的轉錄活性下降;genistein作用后腫瘤細胞核中β-Catenin表達水平下降而正常細胞中β-Catenin無顯著的變化;genistein作用后腫瘤細胞中酪氨酸磷酸化的β-Catenin水平顯著下降,而正常細胞中沒有明顯變化;genistein作用后促進了腫瘤細胞凋亡,而對正常細胞促凋亡作用不顯著;轉染β-Catenin siRNA細胞中Ki-67核心啟動子的轉錄活性增加;轉染β-Catenin質粒的細胞中Ki-67核心啟動子的
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