脊髓沖擊傷動(dòng)物模型的建立及凋亡相關(guān)基因表達(dá)的初步研究.pdf

1、目的: ①研制一種小型沖擊波發(fā)生裝置，模擬爆炸沖擊波的致傷作用。②建立實(shí)驗(yàn)條件下的兔不同程度脊髓沖擊傷動(dòng)物模型。③探討兔脊髓沖擊傷后脊髓組織中Bcl-2、Bax蛋白早期表達(dá)的變化規(guī)律，為進(jìn)一步闡明脊髓沖擊傷的發(fā)生機(jī)制和指導(dǎo)臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法: ①根據(jù)氣體動(dòng)力學(xué)原理，采用破膜技術(shù)及傳感器檢測(cè)技術(shù)，研制出一種由儲(chǔ)氣設(shè)備、發(fā)射系統(tǒng)、沖擊波測(cè)試分析系統(tǒng)所組成的小型沖擊波發(fā)生裝置。檢測(cè)氣源壓力分別為400kPa、500kP

2、a、600kPa、700kPa、800kPa時(shí)該裝置所產(chǎn)生的沖擊波的超壓峰值、持續(xù)時(shí)間及傳播速度，不同的氣源壓力分別重復(fù)5次。②將24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為4組，每組6只。A組：對(duì)照組；B組：氣源壓力為0.4MPa損傷組；C組：氣源壓力為0.6MPa損傷組；D組：氣源壓力為0.8MPa損傷組。采用小型沖擊波發(fā)生裝置，將兔T9和T10全椎板切除顯露硬膜，按分組預(yù)設(shè)氣源壓力實(shí)施單次沖擊波致傷，對(duì)照組僅行椎板全切除，不設(shè)施沖擊波致傷。48h后

3、觀察各組兔后肢運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)功能變化以及脊髓病理學(xué)變化，綜合評(píng)價(jià)脊髓損傷程度。③設(shè)定小型沖擊波發(fā)生裝置的氣源壓力為0.6MPa，單次沖擊波致兔脊髓中度損傷，致傷后在不同時(shí)間點(diǎn)(4～72h)，光鏡觀察脊髓組織形態(tài)學(xué)變化，免疫組織化學(xué)方法觀察Bcl-2和Bax蛋白在脊髓組織的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果: ①小型沖擊波發(fā)生裝置能模擬產(chǎn)生沖擊波，其檢測(cè)到的波形類似于Friedlander波形，即典型空氣沖擊波波形。隨著氣源壓力的增大，沖擊波超壓

4、峰值及速度同時(shí)增大，正壓持續(xù)時(shí)間基本不變。各組數(shù)據(jù)重復(fù)性好。②各組隨著氣源壓力的增大，兔后肢運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)功能損害明顯加重。兔脊髓沖擊傷后48小時(shí)，各組動(dòng)物運(yùn)動(dòng)及感覺(jué)功能評(píng)分差異顯著。傷后48h發(fā)現(xiàn)受損節(jié)段脊髓水腫、變性壞死，脊髓灰質(zhì)的病理?yè)p害嚴(yán)重。③兔脊髓中度沖擊傷后4～72h，光鏡下觀察脊髓組織細(xì)胞腫脹、壞死改變?cè)龆?，脊髓灰質(zhì)的病理?yè)p害嚴(yán)重。沖擊傷后脊髓灰、白質(zhì)均有Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)，但在時(shí)間分布上呈不均一性。Bcl-2在傷后1

5、2h呈陽(yáng)性表達(dá)，表達(dá)高峰持續(xù)在傷后24h～48h，而B(niǎo)ax在傷后4h呈陽(yáng)性表達(dá)，表達(dá)高峰也持續(xù)在傷后24h～48h，但表達(dá)程度始終強(qiáng)于Bcl-2。
　　 結(jié)論：①小型沖擊波發(fā)生裝置能模擬產(chǎn)生沖擊波，且性能穩(wěn)定、安全，可重復(fù)性強(qiáng)。②小型沖擊波發(fā)生裝置建立的動(dòng)物脊髓沖擊傷模型安全、穩(wěn)定、有效，能較好的模擬輕、中、重不同程度脊髓沖擊傷，適用于實(shí)驗(yàn)條件下的脊髓沖擊傷研究。③兔脊髓沖擊傷后損傷早期局部促進(jìn)凋亡的因子表達(dá)占主導(dǎo)優(yōu)勢(shì)，而保護(hù)性