不同粒徑納米氧化鋅對結(jié)腸腺癌Caco-2細(xì)胞的毒性作用研究.pdf

1、納米氧化鋅(ZnO nanoparticles, ZnO NPs)是一種新型無機(jī)功能材料。納米氧化鋅具有獨特的光學(xué)、電學(xué)和熱力學(xué)特性,廣泛的應(yīng)用在防曬護(hù)膚品、家居涂料、合成材料和食品包裝材料。納米材料因其獨特的理化性質(zhì)可以與生物體和環(huán)境相互作用。納米材料在食品加工過程中可以改變食物的口味,特性和貯藏條件。鑒于納米氧化鋅的優(yōu)異性能和廣泛用途,人們通過吸入、誤食和直接皮膚接觸這類新型產(chǎn)品就成為毒性潛在因素,因此引起了人們的高度關(guān)注。通過納米

2、氧化鋅染毒細(xì)胞,我們得出以下結(jié)論:
　　(1)采用馬爾文粒徑儀和透射電鏡對三種納米氧化鋅進(jìn)行粒徑大小、形狀和分布的表征,結(jié)果表明三種納米氧化鋅的顆粒平均大小為26.21±11.14 nm,62.42±9.18 nm,90.81±8.89 nm。
　　(2)采用對胞內(nèi)甲臜的測量來評價細(xì)胞活性。MTT的結(jié)果表明濃度越高、染毒時間越長產(chǎn)生的毒性越大。染毒24小時被選為最適的染毒時間在隨后的實驗設(shè)計中,三種納米氧化鋅對細(xì)胞的半致死率

3、分別為15.55±1.19μg/ml,22.84±1.36μg/ml和18.57±1.27μg/ml。
　　(3)隨著染毒濃度的增加,ROS的產(chǎn)生增加。在低濃度(6.25μg/ml氧化鋅),實驗組產(chǎn)生少量的ROS。而100μg/ml26 nm氧化鋅染毒Caco-2細(xì)胞后,ROS相比于對照組增加了4.5倍。同時在12.5μg/ml26 nm氧化鋅染毒Caco-2細(xì)胞后,胞內(nèi)GSH下降到117μmol/g prot,表明ROS對細(xì)胞內(nèi)

4、氧化平衡造成損傷;25μg/ml26 nm和62 nm氧化鋅染毒細(xì)胞后,GSH下降到106.1和119.7μmol/g prot。在100μg/ml時,所有實驗組的GSH相比于對照組發(fā)生明顯減少。在染毒24小時后,25μg/ml的氧化鋅造成細(xì)胞膜損傷、LDH釋放。50μg/ml90 nm染毒細(xì)胞后,可以檢測到LDH大量釋放,在低濃度(12.5μg/ml)下,氧化鋅沒有產(chǎn)生明顯的細(xì)胞膜破損。
　　(4)吖啶橙(AO)/溴乙錠(EB)

5、可以觀察到DNA熒光和染色質(zhì)皺縮等形態(tài)學(xué)改變。50μg/ml氧化鋅染毒細(xì)胞后表明晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞是主要的細(xì)胞形態(tài)。PI流式細(xì)胞儀的結(jié)果表明,對照組可以觀察到正常的胞內(nèi)染色質(zhì)的含量,其中G0/G1期細(xì)胞占94％,S期細(xì)胞占3%,G2/M期細(xì)胞占2.93%。50μg/ml氧化鋅染毒Caco-2細(xì)胞,G0/G1期細(xì)胞大量減少,S期細(xì)胞、G2/M期細(xì)胞大量增加。62 nm和90 nm氧化鋅染毒細(xì)胞產(chǎn)生了類似的結(jié)果。實驗結(jié)果表明納米氧化鋅染