維生素E琥珀酸酯對NB4細胞誘導分化的影響.pdf

1、目的:
　　檢測在維生素E琥珀酸酯(VES)對急性早幼粒細胞白血病細胞株NB4細胞增殖分化及RAR-α蛋白表達水平的作用。
　　方法:
　　1.細胞增殖的測定:取體外培養(yǎng)的對數(shù)生長期急性早幼粒細胞白血病細胞株——NB4細胞，分別應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細胞72小時，收集細胞并應(yīng)用臺盼藍染色計算細胞存活率。
　　2.細胞分化的測定:取體外培

2、養(yǎng)的對數(shù)生長期急性早幼粒細胞白血病細胞株——NB4細胞，分別應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細胞72小時，收集細胞并應(yīng)用NBT還原實驗檢測細胞分化情況。
　　3.RAR-α蛋白測定:應(yīng)用Westernblot方法。上述對數(shù)生長期NB4細胞分別經(jīng)VES(20μmol/L)、ATRA(1μmol/L)、VES(20μmol/L)聯(lián)合ATRA(1μmol/L)處理48小

3、時，并設(shè)空白對照組;收集細胞，提取蛋白質(zhì)后測定RAR-α蛋白表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.維生素E琥珀酸酯對NB4細胞增殖的影響:應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細胞72小時，活細胞比率分別為89.13％、90.85％、73.95％、72.79％
　　2.維生素E琥珀酸酯對NB4細胞分化的影響:用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，

4、40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細胞72小時，并設(shè)置空白對照組。其NBT陽性比率分別為21.17％、27.33％、9.50％、6.00％;對照組NBT陽性比率為1.67％。
　　3.維生素E琥珀酸酯對NB4細胞RAR-α蛋白表達的影響:聯(lián)用VES(20μmol/L)及ATRA(1μmol/L)組48小時后PML/RAR-α融合蛋白總量較單用ATRA(1μmol/L)組增加，單用VES（20μmol/L）組及聯(lián)用VES(2