Gadd45a在端粒酶缺失小鼠衰老中的作用.pdf

1、Gadd45a作為p53的靶基因，在細(xì)胞的生命過程中有重要作用。調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、維持基因組穩(wěn)定、DNA修復(fù)、細(xì)胞衰老及凋亡、維持機(jī)體的穩(wěn)定性。已有研究發(fā)現(xiàn)，p53及其上下游基因在端粒依賴的衰老過程中起重要作用。然而，對(duì)于Gadd45a基因在端粒功能障礙引起的衰老過程中的調(diào)節(jié)作用還不清楚。我們通過雜交，建立Gadd45a和Terc雙基因敲除小鼠品系，進(jìn)一步互交，建立Gradd45a基因缺失的G3Terc-/-（第三代端粒酶缺失）小鼠品系。在

2、此基礎(chǔ)上，觀察小鼠生存曲線，對(duì)小鼠各個(gè)組織器官進(jìn)行稱重，利用組織切片原位染色、競爭性骨髓移植、小腸隱窩體外培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)手段，對(duì)Gadd45a在G3Terc-/-小鼠衰老中的作用進(jìn)行了研究。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Gadd45a敲除能夠延長G3Terc-/-小鼠的壽命。骨髓競爭性移植實(shí)驗(yàn)和干細(xì)胞競爭性移植實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Gadd45a敲除沒有改善G3Terc-/-小鼠的造血重建能力;小腸石蠟切片PNA探針原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Gadd45a敲

3、除沒有延長G3Terc-/-小鼠的端粒長度。說明G3Terc-/-小鼠中敲除Gadd45a基因沒有改善造血系統(tǒng)的功能和延長端粒。迸一步對(duì)小腸隱窩體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)顯示，Gadd45a敲除能明顯改善G3Terc-/-小鼠小腸的功能。小腸石蠟切片原位TUNEL染色實(shí)驗(yàn)表明Gadd45a敲除能夠減少G3Terc-/-小鼠小腸隱窩中的凋亡細(xì)胞數(shù)目。大腸甲基藍(lán)染色，小腸H&E染色實(shí)驗(yàn)以及心臟、肝臟、腎臟稱重實(shí)驗(yàn)說明，Gadd45a敲除從多個(gè)組織器官改善