漢族人群中SLC26A4和線粒體轉(zhuǎn)錄因子A基因多態(tài)性與阿爾茨海默病的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一種與年齡相關(guān)的進(jìn)行性神經(jīng)系統(tǒng)變性病，是老年人發(fā)生認(rèn)知功能減退及癡呆的最常見的病因。臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶力減退和嚴(yán)重的智能減退，神經(jīng)系統(tǒng)病理改變主要有腦內(nèi)β-淀粉樣肽（Aβ）沉積、神經(jīng)原纖維纏結(jié)和神經(jīng)元缺失等。AD在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)病，隨著老年化時(shí)代的到來，AD以成為影響人類健康的最主要疾病之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)到2010年，全世界已有3500萬人罹患AD，并且隨著年齡的增長,其發(fā)病

2、風(fēng)險(xiǎn)每5年會(huì)成倍增加。AD的致殘率和致死率給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。但目前AD的發(fā)病機(jī)制還不十分清晰，比較有影響的假說主要有“膽堿能學(xué)說”和“β-淀粉樣蛋白學(xué)說”等。隨著遺傳分子生物學(xué)的發(fā)展，人類開始從基因?qū)用鎭韺ふ褹D的發(fā)病機(jī)制及治療方法，目前全基因組關(guān)聯(lián)研究(Genome-wide Association Studies，GWAS）已發(fā)現(xiàn)許多染色體區(qū)域很可能存在與 AD有關(guān)的基因突變，如CLU、CRl、PICALM、PCDH11

3、X、NEDD9以及一些神經(jīng)營養(yǎng)因子等。目前只有載脂蛋白（ApoE）ε4等位基因在世界范圍內(nèi)得到了公認(rèn)，但ApoEε4等位基因只占遲發(fā)型阿爾茨海默病（LOAD）患者遺傳風(fēng)險(xiǎn)的42％。因此，尋找更多的候選基因，對(duì)將來AD的基因診斷和治療至關(guān)重要。近期一項(xiàng)大規(guī)模的全基因關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點(diǎn)與高加索人群遲發(fā)型阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)，然而目前在漢族人群中還沒有關(guān)于上述基因位點(diǎn)多態(tài)性與LOAD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)

4、系的研究報(bào)道。
　　1.SLC26A4基因rs2072064位點(diǎn)多態(tài)性與阿爾茨海默病的相關(guān)性研究：
　　近期一項(xiàng)大規(guī)模的全基因關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點(diǎn)與高加索人群遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)，然而目前還沒有關(guān)于該位點(diǎn)基因變異與亞洲人群LOAD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的研究報(bào)道。本研究旨在探討SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點(diǎn)與北方漢族人群遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）易感

5、性的關(guān)系。采用病例-對(duì)照研究方法，選取599例LOAD患者和598例年齡和性別相匹配的健康對(duì)照作為研究對(duì)象，利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)—連接酶檢測(cè)反應(yīng)(PCR—LDR)技術(shù)進(jìn)行基因分型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因rs2072064多態(tài)性位點(diǎn)的基因頻率和等位基因頻率在病例組和對(duì)照組中有顯著差異(P=0.001；P<0.001)，其中等位基因型A顯著降低LOAD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=0.792, P=0.007)。但是，經(jīng)ApoEε4分層后，僅在Apo

6、Eε4非攜帶亞組中，SLC26A4基因型和等位基因型頻率在 AD組和對(duì)照組中存在顯著差異（基因型p=0.001;等位基因型p=0.001）。此外，logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，在校正性別、年齡和 ApoEε4攜帶狀態(tài)等因素后，該位點(diǎn)仍與LOAD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著關(guān)聯(lián)(顯性模型: OR=0.787,95%CI=0.619-1.000, P=0.050;隱性模型:OR=0.655,95%CI=0.448-0.959, P=0.030;累加模型:

7、 OR=0.792,95% CI=0.661-0.950, P=0.012)。本研究支持SLC26A4基因?yàn)橹袊狈綕h族人群LOAD的易感基因。
　　2.線粒體轉(zhuǎn)錄因子 A基因遺傳多態(tài)性與阿爾茨海默病發(fā)表風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究：
　　線粒體是ATP產(chǎn)生的主要場(chǎng)所，維持人體細(xì)胞的各種正常生理功能，對(duì)于能量需求量特別高的神經(jīng)細(xì)胞來說其功能的完整性尤為重要。有研究表明慢性線粒體 DNA的損傷和線粒體功能缺陷在阿爾茨海默病的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程中

8、發(fā)揮了重要的作用。線粒體轉(zhuǎn)錄因子A（TFAM）具有維持線粒體DNA結(jié)構(gòu)和功能的完整性的作用。越來越多的研究表明TFAM與阿爾茨海默病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用大樣本病例-對(duì)照的研究方法，應(yīng)用生物質(zhì)譜測(cè)序技術(shù)和等位基因特異性多重PCR技術(shù)（Multi-ARMS），檢測(cè)394例臨床確診的遲發(fā)型阿爾茨海默病患者（發(fā)病年齡≥65歲）和390名健康對(duì)照者的TFAM受體基因多態(tài)性位點(diǎn)的等位基因型，基因型和單倍體型及載脂蛋白E基因多態(tài)性位點(diǎn)的等位基因型

9、，基因型和單倍體型的分布特征情況，以探討TFAM基因多態(tài)性、載脂蛋白E基因多態(tài)性以及TFAM基因與載脂蛋白E基因相互作用與遲發(fā)型阿爾茨海默病的關(guān)系。本研究采用SPSS11.5軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩組間人群一般特征差異采用student-t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)，Hardy-Weinberg平衡定律采用卡方檢驗(yàn)。同時(shí)比較AD組和對(duì)照組間基因型、等位基因型和單倍體型分布的差異，計(jì)算比值比（OR）及其95%可信區(qū)間（CI），確定相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度。采用多因素L

10、ogistic回歸分析校正潛在的混淆因素。應(yīng)用SHEsis軟件做單倍體頻率分析。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)，P﹤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果顯示，載脂蛋白E（ApoE）ε4與散發(fā)、晚發(fā)性阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)高度相關(guān)（P＜0.001,OR=2.91),兩組間rs1937基因型頻率和等位基因頻率差異有顯著性（基因型 p=0.03；等位基因型 OR=0.76,95%CI=0.59-0.99,p=0.04）。位點(diǎn)rs2306604基因型和

11、等位基因頻率在AD組與對(duì)照組間均無顯著差異（基因型p=0.76;等位基因型p=0.84）。按性別分層分析后，兩位點(diǎn)基因型和等位基因型頻率未見明顯差異。多因素 logistic分析表明ApoEε4與TFAM基因之間無交互作用，rs1937基因型頻率差異在三種logistic模型中均有顯著差異（顯性模型：OR=0.71,95%CI=0.51-0.97, P=0.03;隱性模型：OR=0.25,95%CI=0.08-0.82, P=0.02;

12、遞加模型：0R=0.68,95%CI=0.51-0.91, P=0.01）。單倍體型分析發(fā)現(xiàn)單倍體型CC在AD的發(fā)病中有保護(hù)作用（OR=0.76,95%CI=0.59-0.99, P=0.038）。中國漢族人群線粒體轉(zhuǎn)錄因子A基因多態(tài)性與阿爾茨海默病相關(guān)，其中rs1937位點(diǎn)等位基因C和單倍體型CC在遲發(fā)型AD發(fā)病進(jìn)程中起保護(hù)作用，該作用可能與TFAM基因點(diǎn)突變Ser12Thr可影響TFAM功能進(jìn)而影響線粒體 DNA的轉(zhuǎn)錄和線粒體結(jié)構(gòu)和