艾迪單用及聯(lián)合阿霉素對(duì)骨肉瘤細(xì)胞MG-63的抑制作用及其對(duì)P21表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究艾迪單用及聯(lián)合阿霉素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的抑制作用,觀測(cè)其是否具有協(xié)同阿霉素誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡，并探討P21在此作用中的表達(dá)變化。
　　方法：以人骨肉瘤細(xì)胞MG-63為研究對(duì)象，測(cè)定細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，選取最佳狀態(tài)人骨肉瘤細(xì)胞做下一步實(shí)驗(yàn)；將不同濃度艾迪（分別為0、5、10、20、40、80μl/mL）作用于人骨肉瘤細(xì)胞，MTT法連續(xù)測(cè)定5天的細(xì)胞增殖抑制率，計(jì)算出艾迪作用的最佳時(shí)效區(qū)間；然后通過MTT法測(cè)出阿霉素抑制

2、人骨肉瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的量效關(guān)系，取抑制率接近50％的阿霉素濃度聯(lián)合不同濃度艾迪，測(cè)定細(xì)胞抑制率并與單獨(dú)阿霉素組比較，探討不同濃度的艾迪和阿霉素組合對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞MG-63增殖及凋亡率的影響，將兩種藥物作用后的細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞儀Annexin V/PI-FITC雙染法測(cè)定細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期；倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)；透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)；并用West blot方法檢測(cè)各組P21表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：1.艾迪在體外對(duì)人

3、骨肉瘤細(xì)胞MG-63的增殖有直接殺傷和抑制作用。表現(xiàn)為在濃度為40μl/ml以下時(shí)呈劑量依賴性，超過該濃度后抑制率變化幅度不大；小于一定作用時(shí)間內(nèi)（48h）呈時(shí)間依賴性，繼續(xù)增加作用時(shí)間抑制率不再明顯增加；2.艾迪能增加阿霉素在體外抑制人骨肉瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡，表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)，一定濃度的艾迪聯(lián)合阿霉素較單獨(dú)阿霉素的作用明顯增強(qiáng)，兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)艾迪能引發(fā)人骨肉瘤細(xì)胞 G0/G1、S期阻滯，

4、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，聯(lián)合組較單獨(dú)阿霉素組凋亡率明顯上升（p<0.05）；4.經(jīng)艾迪干預(yù)后的人骨肉瘤細(xì)胞 MG-63，在倒置相差顯微鏡下可見形態(tài)發(fā)生異常，透射電鏡下可見細(xì)胞凋亡形態(tài)；5.艾迪聯(lián)合阿霉素可誘導(dǎo)更多人骨肉瘤細(xì)胞凋亡，聯(lián)合應(yīng)用時(shí)骨肉瘤細(xì)胞p21表達(dá)明顯上升。
　　結(jié)論：1.艾迪可以抑制人骨肉瘤 MG-63細(xì)胞的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)其凋亡，表現(xiàn)為一定的時(shí)間及劑量依賴性；2.低濃度的艾迪聯(lián)合低濃度的阿霉素對(duì)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的殺傷作用即可