小檗堿對壓力超負荷誘導大鼠心肌肥厚的作用及機制研究.pdf

1、背景：心肌肥厚常發(fā)生于高血壓、心臟瓣膜疾病等壓力負荷過度性疾病，是決定多種心血管疾病預后的獨立危險因子。長期壓力負荷刺激將導致失代償性心肌肥厚、心力衰竭、惡性心律失?；蛐脑葱遭馈Ｗ允墒且环N進化上高度保守的細胞內(nèi)分解代謝的過程，自噬增強是對長期壓力后負荷刺激的一種適應性反應。傳統(tǒng)中藥小檗堿具有心肌保護作用，且在多種細胞上表現(xiàn)出自噬增強的作用，但其心血管保護作用和自噬增強是否相關并不清楚。
　　目的：利用主動脈縮窄手術(TAC)建立

2、壓力超負荷所致的心肌肥厚大鼠模型，探索中藥小檗堿抗心肌肥厚的作用以及具體分子機制。方法:選取體重約200g左右的SD大鼠，分為假手術組(Sham+Vehicle)、主動脈縮窄組(TAC+Vehicle)、小檗堿治療組(TAC+Berberine)以及小檗堿+3-甲基腺嘌呤治療組（TAC+Berberine+3-MA）。TAC術后即刻給予小檗堿10mg/kg每日一次，灌胃給藥;3-甲基腺嘌呤100mg/kg，每兩日一次，腹腔注射給藥。術后

3、4周行超聲檢測大鼠心功能的變化;H&E染色、Masson染色和TUNEL染色觀察心肌細胞大小變化，纖維化程度以及細胞凋亡情況;RT-qPCR方法檢測心肌肥厚標記物的表達情況;透射電鏡檢測心臟組織的結構變化和自噬小體;Western blotting和免疫組化檢測內(nèi)質網(wǎng)應激相關蛋白、自噬相關蛋白和信號通路的變化情況。
　　結果：TAC手術可以明顯增加大鼠心肌肥厚、心臟重量與體重比、心肌細胞凋亡、心臟纖維化以及心肌肥厚分子標記物腦利鈉

4、肽(BNP，brainnatriuretic peptide)的表達，小檗堿可明顯改善壓力負荷所致的上述心臟的改變。在小檗堿顯著改善大鼠心臟肥厚、心肌細胞凋亡以及心功能減退的同時，也可明顯增強大鼠心肌組織的自噬作用。進一步將小檗堿與自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤合用可阻止小檗堿所致的自噬水平的增加，從而消除了小檗堿的抗心肌肥厚、抑制心肌細胞凋亡以及改善心功能紊亂的作用。此外，小檗堿可顯著改善TAC所致的內(nèi)質網(wǎng)應激的增加，且小檗的這種降低內(nèi)質網(wǎng)